Trizol提取RNA用Trizol试剂盒抽提鱼肝脏RNA时,加入氯仿离心取出的上清加入异丙醇后,会出现大量絮状白色物质,离心后有大量沉淀,OD260/OD280约为1.5,估计沉淀中存在大量蛋白质,但为什么会出现此

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/25 02:43:56
Trizol提取RNA用Trizol试剂盒抽提鱼肝脏RNA时,加入氯仿离心取出的上清加入异丙醇后,会出现大量絮状白色物质,离心后有大量沉淀,OD260/OD280约为1.5,估计沉淀中存在大量蛋白质,

Trizol提取RNA用Trizol试剂盒抽提鱼肝脏RNA时,加入氯仿离心取出的上清加入异丙醇后,会出现大量絮状白色物质,离心后有大量沉淀,OD260/OD280约为1.5,估计沉淀中存在大量蛋白质,但为什么会出现此
Trizol提取RNA
用Trizol试剂盒抽提鱼肝脏RNA时,加入氯仿离心取出的上清加入异丙醇后,会出现大量絮状白色物质,离心后有大量沉淀,OD260/OD280约为1.5,估计沉淀中存在大量蛋白质,但为什么会出现此现象呢?同样的试剂和操作提取脾脏则无此现象,

Trizol提取RNA用Trizol试剂盒抽提鱼肝脏RNA时,加入氯仿离心取出的上清加入异丙醇后,会出现大量絮状白色物质,离心后有大量沉淀,OD260/OD280约为1.5,估计沉淀中存在大量蛋白质,但为什么会出现此
造成OD260/OD280偏低有两种情况：
1.DNA 污染
鱼类肝脏的DNA含量比较多.像你提到的加入异丙醇后又大量的白色絮状沉淀出现,极有可能是DNA没有去除干净.
造成DNA污染的原因主要是Trizol加入氯仿时混匀力度不够,造成DNA未被完全萃取.建议氯仿和trizol混匀时加大震荡力度.
2.蛋白质污染
吸取上清时吸取的上清过多,中间层的蛋白质.造成最后的蛋白质污染.严重影响提取RNA的纯度.
其实现在提取RNA,建议不要用Trizol.Trizol虽然是最经典的方法,但也存在着有机抽提（毒性较大）,耗时较长,对操作者要求高等缺点.现行的硅胶柱能很好的解决这个问题.市场上Qiagen,Omega的产品都不错.Qiagen的价格稍高.

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