DNA经过限制性内切酶酶解后电泳,如何根据迁移率推理出该DNA分子内各主要片段的排列顺序?RT,加分多多不吝啬
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/18 21:23:41
DNA经过限制性内切酶酶解后电泳,如何根据迁移率推理出该DNA分子内各主要片段的排列顺序?RT,加分多多不吝啬
DNA经过限制性内切酶酶解后电泳,如何根据迁移率推理出该DNA分子内各主要片段的排列顺序?
RT,加分多多不吝啬
DNA经过限制性内切酶酶解后电泳,如何根据迁移率推理出该DNA分子内各主要片段的排列顺序?RT,加分多多不吝啬
如果象一楼说的那样预想知道酶切位点,那还要推理干什么呢?
除非这样做：比如先用酶A切,得到2个,甚至多个片段.再用酶B切,再用酶C切.这样有可能得到不同的片段.然后再用A,B组合,得到的片段长度和A,B单独切所产生的长度比较,可以推出AB酶切位点的相对位置.如此反复.最后可以得到各个酶切位点的位置.
不知道是不是你要的方法
我理解的是：每次电泳不是都有一个标准品即marker 用所跑的片段与标准品比较就可以得到该片段的大概大小。这样就可以排序咯撒，当然marker也有各种类型，你必须得根据你大概dna的大小来选择，这样较为准确。同时还可以半定量的知道各DNA的量多少。...
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我理解的是：每次电泳不是都有一个标准品即marker 用所跑的片段与标准品比较就可以得到该片段的大概大小。这样就可以排序咯撒，当然marker也有各种类型，你必须得根据你大概dna的大小来选择，这样较为准确。同时还可以半定量的知道各DNA的量多少。
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不太知道……感觉这是要建立在已知该DNA序列和酶切位点的基础上的吧。比如某个基因有500bp，已知某限制性内切酶在位点92、247、405有酶切位点，那么根据电泳条带的迁移率就能算出哪条带是在哪个片段了。
如果不知道序列和酶切位点的话，我也不知道怎么弄，等待高手出现……...
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不太知道……感觉这是要建立在已知该DNA序列和酶切位点的基础上的吧。比如某个基因有500bp，已知某限制性内切酶在位点92、247、405有酶切位点，那么根据电泳条带的迁移率就能算出哪条带是在哪个片段了。
如果不知道序列和酶切位点的话，我也不知道怎么弄，等待高手出现……
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多种单独酶切、双酶切组合，然后根据片段大小计算。类似于蛋白片段常用的分析手段。
例如用EcoRI （g'aattc）和EcoRV（gat'atc）分析一段DNA，EI切出1kb、3kb的带，两条片段分别再用EV处理，1kb没切开，3kb切成0.5kb和2.5kb；再单独用EV处理原片段。如果得到1.5kb和2.5kb，则排列为1kb-EI-0.5kb-EV-2.5kb；如果得到3.5和0....
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多种单独酶切、双酶切组合，然后根据片段大小计算。类似于蛋白片段常用的分析手段。
例如用EcoRI （g'aattc）和EcoRV（gat'atc）分析一段DNA，EI切出1kb、3kb的带，两条片段分别再用EV处理，1kb没切开，3kb切成0.5kb和2.5kb；再单独用EV处理原片段。如果得到1.5kb和2.5kb，则排列为1kb-EI-0.5kb-EV-2.5kb；如果得到3.5和0.5kb，则排列为1kb-EI-2.5kb-EV-0.5kb。3'和5‘顺序是无法确定的。
这是一个十分简单的例子，复杂情况可以用相同思路。
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