动物细胞贴壁培养的方法有哪些
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/31 17:18:52
动物细胞贴壁培养的方法有哪些动物细胞贴壁培养的方法有哪些动物细胞贴壁培养的方法有哪些原代培养有两种组织块培养法:1)将上述剪好的小块放入15ml离心管中用10ml的Hanks洗液强有力的反复吹打,10
动物细胞贴壁培养的方法有哪些
动物细胞贴壁培养的方法有哪些
动物细胞贴壁培养的方法有哪些
原代培养有两种
组织块培养法:
1)将上述剪好的小块放入15ml离心管中用10ml的Hanks洗液强有力的反复吹打,1000转离 心1分钟,弃去上清,重复一次.
2)用习惯将组织块放入25cm2 培养瓶中,竖起培养瓶,加入1-2ml培养液,培养箱中将培养瓶底朝上,放置2-4小时,小心将培养瓶方正,继续培养.
3)培养3-4小时后缓慢取出培养瓶,加5ml培养液,继续培养.
4)三天后小心取出观察,搜集漂浮组织块,置入离心管中,400转离心3分钟,弃去三分之二 上清,补加5ml培养液,移入25cm2 培养瓶中继续培养.
消化培养法:
1)将上述剪好的小块放入15ml离心管中,加入5-10ml的IV胶原酶消化液,放入37℃水浴中不断震荡,联系观察一小时,直至组织块弥散开为止,每隔30分钟收集消化液.
2)400转离心4分钟,收集细胞沉淀,用Hanks洗液冲洗,并重复一次.
3)将收集的细胞沉淀,用培养液重悬,置于4°冰箱,直至消化全部结束.
4)将细胞悬液通过250目不锈钢钢筛,将滤液置于25cm2 培养瓶中,放入培养箱培养.
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