质粒酶切鉴定时应注意哪些事项
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/02/01 04:54:55
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1.质粒浓度最好比较高,鉴定要求整个体系里有500-1000ng质粒比较好,太少的话可能酶切下来的目的条带看不清楚于是误以为鉴定失败.
2.酶的浓度控制在总体系的5%~10%左右,太高的酶浓度会让保存酶的甘油浓度过高而产生星号活性.体系20-50ul即可.酶切37℃,时间3-4h就可以,当然过夜也行.
3.可以用空载质粒作为对照组.
如果还有其他的疑问,欢迎追问~
单酶切切还是双酶切??菌落PCR不是很准确,单酶切是应该只有一个目的条带啊,你其额定酶是好的吗??同意提质粒做PCR 1)把提取的质粒和空质粒一起
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