为什么sanger测序法只能准确的测大约一千个碱基对?测序的图谱为什么会出现双峰值和前后的序列不准确?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/19 21:33:12
为什么sanger测序法只能准确的测大约一千个碱基对?测序的图谱为什么会出现双峰值和前后的序列不准确?为什么sanger测序法只能准确的测大约一千个碱基对?测序的图谱为什么会出现双峰值和前后的序列不准
为什么sanger测序法只能准确的测大约一千个碱基对?测序的图谱为什么会出现双峰值和前后的序列不准确?
为什么sanger测序法只能准确的测大约一千个碱基对?测序的图谱为什么会出现双峰值和前后的序列不准确?
为什么sanger测序法只能准确的测大约一千个碱基对?测序的图谱为什么会出现双峰值和前后的序列不准确?
我来帮你回答后两个问题.出现双峰是因为引物与目的片段或者载体存在多个结合位点,或者目的片段有碱基缺失,又或者存在等位基因.至于前后序列不准确是因为刚出峰时信号值较大,造成前序列不准确.到了尾段,信号值有变小,导致分辨率逐渐下降,既峰图不准确
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这是sanger一代测序的弱势，800bp之后会出现较严重的错配。
测序双峰的原因主要有 PCR条带不纯，有非特异条带；或者产物中有ployA等poly结构，测序时出现滑链现象就会有双峰。
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