如果已经将质粒导入大肠杆菌,并将大肠杆菌放在含有四环素的培养基上培养会出现什么现象
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/22 08:00:33
如果已经将质粒导入大肠杆菌,并将大肠杆菌放在含有四环素的培养基上培养会出现什么现象
如果已经将质粒导入大肠杆菌,并将大肠杆菌放在含有四环素的培养基上培养会出现什么现象
如果已经将质粒导入大肠杆菌,并将大肠杆菌放在含有四环素的培养基上培养会出现什么现象
当然可以利用大肠杆菌制胰岛素,这就是基因工程方法.把胰岛素编码基因克隆到在大肠杆菌里的表达载体,通常都是可诱导型载体,以防止对大肠杆菌的毒性.然后在大肠杆菌里表达就可以得到胰岛素.
因为大肠杆菌里没有内质网（真核生物特有的细胞器）,所以在大肠杆菌里合成胰岛素不需要内质网.
下面再补充点材料,能有利于加深理解,
胰岛素具有两个特性使其能够利用基因克隆技术进行生产.一、胰岛素这种人体蛋白在翻译糖化后不再进行修饰,通过细菌合成的重组胰岛素是有活性的.二、分子量.胰岛素是相对较小的蛋白质,含有两个多肽,A链有21个氨基酸,B链有30个氨基酸.在人体中首先合成的是前胰岛素原,A链和B链通过C链相连,前端还有一段前导序列.翻译后,C链和前导序列被切除,A链和B链通过两个二硫键相连.
a) 合成和表达人工胰岛素基因
1978年合成了A链和B链的基因.人工合成的基因不一定与人体内的基因序列相同,但对应的氨基酸序列必须正确.
随后构建了两个重组的质粒,一个编码A链,另一个编码B链,每一个质粒中,人工基因都被插入到pBR322类的质粒的lacZ’读码框内.胰岛素基因就在lac启动子的控制之下进行合成,产生了的多肽含有β-半乳糖苷酶的最初几个氨基酸.两者之间的连接处是一个蛋氨酸残基,可以利用cyanogen bromide溴化氢从此处切开.最后将两条链用二硫键连接起来.效率很低.
b) 将整个地读码框B-C-A构建载体,这样就可以高效的形成二硫键.利用蛋白水解酶很容易将C链切下.
有些死亡 有些存活并形成菌落 根据你提的问题 所使用的目的基因上应该有四环素抗性基因 在导入目的基因时后 质粒上就有了四环素抗性基因 如果质粒表达则存活而被选择 为人所用 若不表达则死亡 这是生物工程中常用的选择方式
如果你的质粒带有四环素抗性，并成功转化入细菌，划板后可以长出单克隆菌落。