已知某段DNA序列,如何设计实验得到该DNA可能具有的功能如题,已知一段DNA序列,怎么样才能知道这段DNA可能的功能呢另外还有一个问题,已知某蛋白,如何证明该蛋白是否能够结合到某段DNA调控
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/22 14:14:08
已知某段DNA序列,如何设计实验得到该DNA可能具有的功能如题,已知一段DNA序列,怎么样才能知道这段DNA可能的功能呢另外还有一个问题,已知某蛋白,如何证明该蛋白是否能够结合到某段DNA调控
已知某段DNA序列,如何设计实验得到该DNA可能具有的功能
如题,已知一段DNA序列,怎么样才能知道这段DNA可能的功能呢
另外还有一个问题,已知某蛋白,如何证明该蛋白是否能够结合到某段DNA调控序列上(即是否能够影响其下游基因的表达)
是几道考研常考的分子生物学实验类题目,最好用本科的知识回答的。主要是基本的原理,但是没看懂…继续求助…
已知某段DNA序列,如何设计实验得到该DNA可能具有的功能如题,已知一段DNA序列,怎么样才能知道这段DNA可能的功能呢另外还有一个问题,已知某蛋白,如何证明该蛋白是否能够结合到某段DNA调控
1.先做序列分析.看是编码序列还是非编码序列.如果是编码序列,则看所编码的蛋白质功能.非编码序列,到Google上搜promoter prediction.然后输入你的序列.可以推测该序列作为promoter的功能.
2.证明就是要做实验了.ChIP是金标准.原理就是先固定活细胞,使DNA和其上所结合的蛋白发生交联.再用超声震荡是DNA-蛋白质复合体的大小到1K左右.然后用针对该蛋白的抗体做免疫沉淀.这样只有和该蛋白结合的DNA才会被一起沉淀下来.然后复性DNA.收集后做PCR.看是不是你要的那段序列.
第一个 设计引物 pcr扩增 然后转入感受态 E. coli 看表达效果
或者尝试做基因knock out 看有什么影响 剩下我也不知道有什么好方法了~~
第二个,去服务器上做一个结构模拟 看一下是不是相应的DNA结合位点 另外貌似现在不是有转录因子的数据库吗?可以尝试着比对一下...
全部展开
第一个 设计引物 pcr扩增 然后转入感受态 E. coli 看表达效果
或者尝试做基因knock out 看有什么影响 剩下我也不知道有什么好方法了~~
第二个,去服务器上做一个结构模拟 看一下是不是相应的DNA结合位点 另外貌似现在不是有转录因子的数据库吗?可以尝试着比对一下
收起
对于基因组序列分析,采用单链DNA模板和缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种有效的测定方法。
一个DNA序列不一定是一个基因,个人认为要是考题的话改成基因比较好。将含有这个基因的正义和反义序列的载体分别导入该物种,使基因超表达或沉默,看看对生物体的影响以推测其功能。第二题的话,用该蛋白与部分酶切后电泳分离的DNA片段杂交看看有无杂交信号,有的话回收该DNA片段,与特殊的用于启动子筛选的载体连接,导入菌种看看有没有阳性菌,有的话就说明该蛋白与启动子有相互作用啦!当然在这里只是简单叙述一下,做...
全部展开
一个DNA序列不一定是一个基因,个人认为要是考题的话改成基因比较好。将含有这个基因的正义和反义序列的载体分别导入该物种,使基因超表达或沉默,看看对生物体的影响以推测其功能。第二题的话,用该蛋白与部分酶切后电泳分离的DNA片段杂交看看有无杂交信号,有的话回收该DNA片段,与特殊的用于启动子筛选的载体连接,导入菌种看看有没有阳性菌,有的话就说明该蛋白与启动子有相互作用啦!当然在这里只是简单叙述一下,做起来的话会很麻烦也有一定难度。
收起
第一个问题:RNAi,
第二个问题:CHIP(染色质免疫沉淀)