PCR的原理在植物遗传多样性研究中的应用有哪些是论述题,种内也有（什么遗传漂变,在不同地方的同种差异）种间也有（关于鉴定）谢谢,种间的要详细点
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/23 02:32:32
PCR的原理在植物遗传多样性研究中的应用有哪些是论述题,种内也有（什么遗传漂变,在不同地方的同种差异）种间也有（关于鉴定）谢谢,种间的要详细点
PCR的原理在植物遗传多样性研究中的应用有哪些
是论述题,种内也有（什么遗传漂变,在不同地方的同种差异）种间也有（关于鉴定）谢谢,种间的要详细点
PCR的原理在植物遗传多样性研究中的应用有哪些是论述题,种内也有（什么遗传漂变,在不同地方的同种差异）种间也有（关于鉴定）谢谢,种间的要详细点
1.PCR特异扩增ITS序列.这是目前鉴定物种和做分子分类研究的最主流的方法.原理是:ITS序列是中度重复序列,广泛分布于基因组并且是同步进化的,而且不同物种间进化差异很大,它的碱基序列同源性的程度决定生物之间的亲源关系远近,并可以以此来作为分类依据划分物种.另外对于未知物种,可以通过与GENEBANK提供的序列比对来确定该物种的分类归属,达到鉴定的目的.ITS序列在核糖体大小亚基的rRNA之间,核糖体大小亚基的rRNA序列非常保守,便于设计PCR过程所需的两端特异性引物,进行典型的锚定PCR.
2.差异显示PCR.可以用来研究同一个体不同生长时段和不同组织(或分化结构)或者不同个体之间基因表达差异.原理是:根据中心法则,每一个阅读框要表达必须先转录成mRNA.那么在不同细胞内只要存在基因差异表达现象,肯定就会存在不同的mRNA.我们可以提取细胞的mRNA,然后将其反转录为cDNA,并以此来作为PCR模板.由于mRNA的3端具有polyA特殊结构,因此可以这样设计引物:引物1与cDNA的polyT互补,引物2随机合成大约10bp左右.PCR产物用1%的琼脂糖凝胶电泳检测.这样通过PCR就可以显示并放大出mRNA的差异,从而找到差异表达的基因.
3.AFLP(限制性酶切片段多样性).基于RFLP和PCR技术发展起来的一种用来研究分类的技术.原理是:不同物种的DNA序列不同,那么用同种限制性内切酶酶切会得到不同的片段,这些不同的片段中,有很多长度也会有不同.通过同样两种限制性内切酶消化后,根据酶切位点序列设计互补序列并额外添加一段特异性序列,用T4连接酶补平,经过两次PCR扩增(预扩增和二次扩增),产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,银染色后用专门的分析软件分析,根据条带分布差异的程度来划分物种间的亲缘关系.
目前就想到这些,本人正是做分子分类的.