基因工程中为何只能用氯化钙处理微生物细胞?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 14:34:13
基因工程中为何只能用氯化钙处理微生物细胞?
基因工程中为何只能用氯化钙处理微生物细胞?
基因工程中为何只能用氯化钙处理微生物细胞?
因为微生物实在太小,不可能使用显微注射法注入DNA,只能让它自行吸收DNA,但正常状态下微生物不会自行吸收DNA,所以需要刺激它来让它吸收DNA,经过科学家无数次的实验,目前发现只有钙盐溶液可以让微生物变为感受态细胞,你想问为什么只能用氯化钙是因为目前没发现其他的试剂可以做到相同的效果,并且动植物细胞由于进化太多,已经不可能再变为感受态（也可能是人类技术达不到让动植物细胞变为感受态）,所以目前只有氯化钙而且只能处理微生物细胞
你是想问氯化钙法制作感受态细胞么
CaCl2法
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞
细胞膜通透性发生变化，极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基－磷酸钙复合物。
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你是想问氯化钙法制作感受态细胞么
CaCl2法
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞
细胞膜通透性发生变化，极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基－磷酸钙复合物。
2.此时，将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激（90s），细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动，并随机出现许多间隙，外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达，实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。
3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养，筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。
收起
增大细胞膜的通透性，使之成为感态细胞
也可以用电击转化、原生质体融合
钙离子和要转化的基因结合会形成抗内切酶的羟基-磷酸钙复合物，粘附在细菌细胞表面，当热激时，细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动，产生裂缝，使基因被转化进入胞内