骨髓细胞原代培养细胞总是生长得不理想,是微环境模仿的不对还是什么原因呢?我抽提的兔骨髓细胞(欲分离骨髓基质干细胞)原代培养的时候.细胞总是生长得不理想,连分瓶都无法实现,我用的

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/24 21:14:44

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骨髓细胞原代培养细胞总是生长得不理想,是微环境模仿的不对还是什么原因呢?
我抽提的兔骨髓细胞(欲分离骨髓基质干细胞)原代培养的时候.细胞总是生长得不理想,连分瓶都无法实现,我用的是DMEM培养基,是微环境模仿的不对还是什么原因呢?

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博凌科为兔骨髓MSC的分离：取成年新西兰兔用3%戊巴比妥钠按1mg/kg的剂量施以全身麻醉,另用1%利多卡因于手术部位施以局麻；无菌操作下于右胫骨上端内侧部用锐性穿刺锥于骨皮质上开出一直径约2-3mm的孔,使通达髓腔；用18号硬膜外穿刺针接5ml注射器,内含3000U/ml的肝素0.1ml,沿骨皮质上的孔穿入髓腔,抽出骨髓血约2ml；抽出的骨髓血用平衡液洗涤两次后,离心180xg,5min；弃去上清液,沉淀用Ham f12-10%FBS培养液重新打匀；用灭菌的0.17mol/L饱和NH4Cl溶液按1∶5的体积比加入已重新打匀的悬液中,4℃下保留10min,取出再离心180xg,5min；弃去上清后,以几滴平衡液再悬浮后,用细胞计数板作细胞计数,确认有核骨髓细胞量达106-107后,即可进行原代培养接种用.

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