请详述乳糖操纵子正负调控机制,并结合此机制解释基因重组技术中蓝白斑筛选的原理.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 23:42:12
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请详述乳糖操纵子正负调控机制,并结合此机制解释基因重组技术中蓝白斑筛选的原理.
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α-互补 的原理
载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.E.coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分序列的编码信息.在各自独立的情况下,载体和DH5α编码的β-半乳糖苷酶的片段都没有酶活性.但在二者融为一体时可形成具有酶活性的蛋白质.这种lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补.
蓝白斑筛选的机理
由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别,它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落.当外源片段插入到载体的多克隆位点上后会导致读码框架改变,表达蛋白失活,产生的氨基酸片段失去α-互补能力,因此在同样条件下含重组质粒的转化子在生色诱导培养基上只能形成白色菌落.
在麦康凯培养基上,α-互补产生的Lac+细菌由于含β-半乳糖苷酶,能分解麦康凯培养基中的乳糖,产生乳酸,使pH下降,因而产生红色菌落,而当外源片段插入后,失去α-互补能力,因而不产生β-半乳糖苷酶,无法分解培养基中的乳糖,菌落呈白色.
请详述乳糖操纵子正负调控机制,并结合此机制解释基因重组技术中蓝白斑筛选的原理.
绘图说明乳糖操纵子的正负调控机制?
乳糖操纵子的调控原理
乳糖操纵子的作用机制?
乳糖操纵子的调节机制
简述乳糖操纵子的调控原理.
乳糖操纵子的结构及其调控原理
简述乳糖操纵子的表达调控特点
乳糖操纵子诱导系统的调控模式
大肠杆菌乳糖操纵子调控机理是什么?
请叙述大肠杆菌乳糖操纵子结构基因转录的调控过程
为什么说乳糖操纵子的功能实际上是正负两个相互独立的调控体系作用下实现的
乳糖操纵子的正、负调控简答
乳糖操纵子的调控.好像应该从正、负两个方面进行讨论.
以乳糖操纵子为例原核生物基因表达调控的原理
以乳糖操纵子为例说明酶诱导合成的调控过程
简述乳糖操纵子模型
简述乳糖操纵子学说