细胞生物学论述题试述显示细胞内DNA的原理和方法?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 08:10:57
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细胞生物学论述题试述显示细胞内DNA的原理和方法?
细胞生物学论述题
试述显示细胞内DNA的原理和方法?

细胞生物学论述题试述显示细胞内DNA的原理和方法?
先染色,然后在荧光显微镜(比如共聚焦)下看.
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用与荧光显微镜观测[1].因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色.
在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发.当DAPI与双股DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm,其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色.DAPI也可以和RNA结合,但产生的荧光强度不及与DNA结合的结果,其发散光的波长范围约在400nm左右.
DAPI的发散光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长,仅有少部分重叠,研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色.
DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物.使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序.