如何从众多染色体中提取其中一个并PCR扩增其中一个基因?如题,比如人体支气管上皮细胞（HBE cell）,一般好像是提取总DNA,然后好像就是PCR了吧?但如果是这样的话,那引物设计时不是要比对所
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/18 20:35:49
如何从众多染色体中提取其中一个并PCR扩增其中一个基因?如题,比如人体支气管上皮细胞（HBE cell）,一般好像是提取总DNA,然后好像就是PCR了吧?但如果是这样的话,那引物设计时不是要比对所
如何从众多染色体中提取其中一个并PCR扩增其中一个基因?
如题,
比如人体支气管上皮细胞（HBE cell）,一般好像是提取总DNA,然后好像就是PCR了吧?但如果是这样的话,那引物设计时不是要比对所有染色体上的所有碱基以确定特异性,确定我的引物可以把,比如20号染色体上的某个基因给扩增出来?是不是这样呢?如果不是,应该如何做?
如何从众多染色体中提取其中一个并PCR扩增其中一个基因?如题,比如人体支气管上皮细胞（HBE cell）,一般好像是提取总DNA,然后好像就是PCR了吧?但如果是这样的话,那引物设计时不是要比对所
你肯定不能比对所有序列,不可能的事吧.你想扩增基因,起码先知道了部分或者全部的序列,一般是知道了全部序列,按照原则设计好引物,提取总DNA然后pcr就行了.由于没有对比全部基因组序列,引物可能会扩增出其他基因或者基因片段.电泳一下,因为你知道你要的这个基因有多长,所以看下相应的bp位置,然后用试剂盒凝胶回收这个长度的DNA片段就行了.
另外没有从染色体中提取一个基因的说法,你都能提取出来,要PCR干啥呢.从染色体基因组中扩增基因.
就算基因组很庞大，但是你的引物长度到20个碱基左右就足够保证特异性了。
你想再找一段20个碱基的DNA序列一样概率多大？4的二十次方之一！基因组能有几个4的二十次方20bp长的片段？
假如，这是一道题，我的思路是：
首先，这个基因的序列是已知的还是未知的呢？
假如已知的话，就很容易，提取总DNA，然后利用primer3的软件，找到这段序列上下游的特异性位点，设计引物，然后扩增出来就行了，想要提高实验的可信度，可以电泳，切胶，送测序。
假如未知，就复杂一些了。就你提供的情况，好像是知道大概的位置，那么，你需要得到一张该生物的genetic map，确定该位...
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假如，这是一道题，我的思路是：
首先，这个基因的序列是已知的还是未知的呢？
假如已知的话，就很容易，提取总DNA，然后利用primer3的软件，找到这段序列上下游的特异性位点，设计引物，然后扩增出来就行了，想要提高实验的可信度，可以电泳，切胶，送测序。
假如未知，就复杂一些了。就你提供的情况，好像是知道大概的位置，那么，你需要得到一张该生物的genetic map，确定该位点附近的marker，找到离该位点最靠近的一对（或几对）特异性marker，扩增，电泳，切胶，得到单一片段，送测序，对比测序结果，得到可行的开放阅读框。
我是入门者，拙见，望高手指点。
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1，首先，没人去冲总DNA中分离1个染色体来扩增
2，20个bp的引物，扩增目标基因已经足够了，不用担心会有非常多的产物
3，上边说的第2条，是在你PCR条件非常合理的情况下，如果你扩出很多非特异性条带或者拖尾，建议改良PCR条件，使用热启动，降低退火温度等手段加强特异性条带。
4，当然，你要保证自己的引物设计的合理，尽量不要形成发夹结构，GC含量合适。。等等...
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1，首先，没人去冲总DNA中分离1个染色体来扩增
2，20个bp的引物，扩增目标基因已经足够了，不用担心会有非常多的产物
3，上边说的第2条，是在你PCR条件非常合理的情况下，如果你扩出很多非特异性条带或者拖尾，建议改良PCR条件，使用热启动，降低退火温度等手段加强特异性条带。
4，当然，你要保证自己的引物设计的合理，尽量不要形成发夹结构，GC含量合适。。等等
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