刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2025/01/19 07:09:43

刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR72度

刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果
刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：
1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~
2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果好,还是PCR后,再加效果好~
3.如何鉴定是不是加A尾成功了?有没什么方法做个阳性对照?
4.要不要加A尾成功了,再进行一次纯化,然后再连接载体呢?

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1 一般不需要,你可以比对你用的高保真酶的buffer和Taq酶的buffer,要加也只能加差异的部分,如果直接加buffer里面离子浓度肯定都不对了；
2 都可以,不过我觉得还是应该在充分延伸后暂停或重新换程序；
3 TA克隆成功说明加A成功；如果要做阳性对照就用Taq酶直接PCR一管；
4 一定要纯化,不然里面全是A,你得到的就大部分是假阳性!

关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2. 刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果 DNA分子末端是什么什么是DNA末端复制 DNA克隆概念两个DNA相同的人算不算克隆人我在电视上看到两兄弟他们DNA相同,不知道他们算不算克隆人基因克隆就是DNA克隆吗 ..刚刚学... DNA粘性末端或平头末端是怎样子的? 什么是BAC 末端测序?有关DNA测序的方面我比较的愚钝，我想知道的是这个BAC末端测序中的BAC是什么意思？测序原理是什么？希望网上粘贴的能修改一下。 DNA分子的黏性末端是什么? 切割后DNA产生的末端有刚刚学题很难应该做些什么准备? 基因工程考研题目：试述将一个平末端DNA片段克隆到载体上EcoRI和Xhol限制位点之间去的方法?（1）平末端的DNA片段两端接接头或衔接物；（2）载体补平再连接答案给的要点太短了,会的老师同基因克隆和DNA克隆是一样的吗? 人们常说的露两点,三点,四点是什么啊?刚刚在网上看到说汤唯4点全漏`哪四点呢? 都是xx惹的祸 500字以上如题,仅供参考刚刚在网上看到的作文! 用PCR合成DNA属于克隆吗