原代细胞冻存基本技术哪位能介绍一下啊
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/08/29 01:08:34
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原代细胞冻存基本技术 1、选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×105进行冻存.2、原代细胞冻存24小时,须换液新鲜原代细胞培养液一次.3、贴壁的原代细胞需常规用0.25%胰酶消化,将消化后的细胞悬液收集至细胞离心管中.4、细胞离心管在1000rpm下离心5分钟,小心弃清液.5、将细胞冻存液加入细胞离心管中,悬浮细胞.细胞计数调整至5×105/ml.6、将悬浮细胞放置细胞冻存管中.密封细胞冻存管.标明细胞种类和冻存日期.请记住:封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂.请按下列顺序降温保存原代细胞:室温→4℃(20 分钟)→ 冰箱冷冻室(30 分钟)→ 超低温冰箱(-80℃过夜)→ 液氮.原代细胞冻存液常用配方:70%完全原代细胞培养液(不含有血清、添加剂、双抗)+ 20%胎牛血清 + 10%DMSO 只是简单的介绍了一下,更详细的介绍可以到生物帮那里了解啊,希望我的回答可以帮到你 有空的话可以去 www.bio1000.com/zt/cell/33895.html 详细的了解一下.那里信息内容丰富、科学、专业,
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各种传代细胞培养中要冻存,为什么冻存?各种细胞要求传几代必须冻存一次?可不可以连续冻存?以VERO细胞及2BS细胞或其他细胞系为例介绍一下.
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