怎样去除TritonX-100对考马斯亮蓝法测定蛋白的影响
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 09:26:15
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考马斯亮蓝染色法测定法不会受绝大部分样品中的化学物质的影响.巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5 mM.但受略高浓度的表面活性剂影响.若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量样品加水稀释到适当浓度,再行测定.也可选用BCA法蛋白测定.
BCA检测试剂可兼容样品中高达5%的SDS,5%的TritonX-100,5%的Tween20,60,80.但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于1 mM,β-巯基乙醇低于10 mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1 mM,β-巯基乙醇低于1 mM.
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