怎样用分光光度法测菌体的生长曲线?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 13:06:53
怎样用分光光度法测菌体的生长曲线?
怎样用分光光度法测菌体的生长曲线?
怎样用分光光度法测菌体的生长曲线?
我们做过这个实验,我给你说点具体的（大肠杆菌为例）：
1 配置培养基,就是牛肉膏蛋白胨培养基,要液体的.
2 按一定量分装到试管里（需要13*3支,3支一组）,灭菌.
3 冷却后取大肠杆菌悬液,用移液枪分别接种到试管培养基中
4 把12组放入37度摇床培养,取一组马上测OD值,三个值取平均数,偏差太大者舍去
5 在2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24小时后分别测其他组.如果无法在特定时间测,也要在那一时间将该组在摇床取出冷冻保存,能测时取出测量即可
6 将得到的值换算后画图即可
我做过了不是很难,数据比较变态,但图作出来还是有正确的走势的,是个时期都能显示出来
细菌生长曲线的测定
一、目的要求
了解细菌生长曲线的特点及测定的原理
学习用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
二、基本原理
少量的细菌，接种到一定体积的、合适的新鲜液体培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标、生长时间作横坐标，绘制的曲线为生长曲线。一般生长曲线可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期(图8-4-1)，生长曲线是...
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细菌生长曲线的测定
一、目的要求
了解细菌生长曲线的特点及测定的原理
学习用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
二、基本原理
少量的细菌，接种到一定体积的、合适的新鲜液体培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标、生长时间作横坐标，绘制的曲线为生长曲线。一般生长曲线可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期(图8-4-1)，生长曲线是微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。不同的微生物其生长曲线不同，即使是同一种微生物，在不同的培养条件其生长曲线也不同，测定在一定条件下培养的微生物的生长曲线。在科学研究及生产上是非常有意义的。
大肠杆菌是微生物学教学和科研常用菌种，也是某些生物制品的生产菌种，常需要了解在一定条件下其生长曲线的特征。测定微生物的数量如本章实验1-3所介绍有多种不同的方法，可以根据要求和实验室的条件选用。本实验用光电比色计进行比浊，测定OD值的方法、此法所需仪器不多，操作简便、迅速。
三、实验材料
(一)仪器
光电比色计、试管、锥形瓶、移液管
(二)培养基和菌种
肉膏蛋白胨培养液、大肠杆菌菌种
四、实验内容
(1)预先将大肠杆菌接种到肉膏蛋白胨培养液中，37℃振荡培养18h备用。
(2)把光电比色计的波长调至420 nm，开机预热10-15min。
(3)以未接种的肉膏蛋白胨培养液校正比色计的零点(以后每次测定都要重新校正零点)。
(4)取盛有150 mL无菌肉膏蛋白胨培养液的500 mL锥形瓶6个，分为两组，分别编号为1、2、3号和4、5、6号。各瓶加入培养18h的大肠杆菌培养液10 mL，37℃下振荡培养。
(5)于接种后的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 h，分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5mL，在光电比色计上测定OD420值。若菌液太浓时，作适当稀释，使OD420值在0.0-0.4之间较好。经稀释后测得OD420值要乘以稀释倍数，才是培养液实际的OD420值。
(6)于培养第8h取样测定后，向其中一组(1-3号)每瓶加入肉膏胨培养液的5倍浓缩液10 mL作补料；另一组(4-6号)每瓶加入10 mL无菌水。继续振荡培养和定时测定。
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