急问：怎么制备病毒的多抗（兔子）?以前做过些多肽的抗体,但是没做过病毒的抗体,这里有没人做过,要不要加佐剂?抗原（病毒）需要做什么特殊的处理吗?

急问：怎么制备病毒的多抗（兔子）?以前做过些多肽的抗体,但是没做过病毒的抗体,这里有没人做过,要不要加佐剂?抗原（病毒）需要做什么特殊的处理吗?
急问：怎么制备病毒的多抗（兔子）?
以前做过些多肽的抗体,但是没做过病毒的抗体,这里有没人做过,
要不要加佐剂?抗原（病毒）需要做什么特殊的处理吗?

急问：怎么制备病毒的多抗（兔子）?以前做过些多肽的抗体,但是没做过病毒的抗体,这里有没人做过,要不要加佐剂?抗原（病毒）需要做什么特殊的处理吗?
一、前言
在生物医药研究、诊断学和治疗学领域,单克隆抗体已经成为了不可或缺的研究手段.目前世界上商品化的单抗有数万种左右,其中绝大部分是小鼠单抗,这些抗体在生物医学的科研和临床中发挥了非常巨大的作用.但小鼠单抗的使用有其局限性,最主要的是难以用于小鼠自身蛋白的检测.这是由于正常情况下,小鼠对自身蛋白存在耐受性,一般无法对其产生免疫反应.目前小鼠作为模式生物广泛用于生物医学科研,缺乏针对小鼠的单抗给研究造成了很大困难.显然,要想得到可以用于小鼠模型的抗体必须使用其他动物.当前最常用于小鼠模型研究的工具抗体是兔多抗.多抗尽管制备难度较低,但是其应用有一定限制.首先制备多抗需要大量抗原,且纯度要求较高；其次多抗的制备具有批间差异,不利于质量控制；再加之多抗的特异性较低,检测本底较高.而单抗由于高特异性、均一性以及易于大量生产等优点成为小鼠模型研究最理想的工具抗体.一般来说,可以通过多种动物制备单抗,包括小鼠、大鼠和兔子,其中小鼠单抗最为成熟,商品化的数量也最多,但是小鼠难以产生针对自身蛋白的抗体（虽然也有公司研发出小鼠抗小鼠蛋白的抗体,但不论是数量还是质量都无法满足需求）.兔的单抗很少（只有美国的Epitomics公司生产兔单抗）,大鼠单抗数量介于小鼠和兔之间.Biocompare统计的商品化单抗中,大鼠单抗不及小鼠的10%,主要原因是大鼠单抗比小鼠单抗制备相对困难.目前世界上只有为数不多的几个著名公司和研究机构提供大鼠单抗的技术服务（如Merck旗下的Calbiochem®,英国的AD Serotech®,美国的Fitzgerald®和BD®,此外,国内Absea®公司的大鼠单抗技术也很成熟）.下面笔者将套用法国文豪大仲马的《三个火枪手》中的人物来分别介绍这三种单抗.
二、“冷面枪手”阿托斯——小鼠单抗
《三个火枪手》中最受读者欢迎的莫过于“冷面枪手”阿托斯了,他的沉着冷静和处变不惊深深地吸引了每一位读者.相对应地,在抗体领域,目前最受科研和生产亲睐的非小鼠单抗莫属了.
1975年,Kohler和Milstein发明了具有划时代意义的新技术——利用B淋巴细胞杂交瘤产生单克隆抗体,并因此获得了1984年诺贝尔生理医学奖.杂交瘤技术的基本原理是：将在体外不能长期生存的B淋巴细胞与在体外能连续增殖的瘤细胞融合而产生杂交瘤细胞,该细胞承袭了两组亲代细胞的遗传特性:既保持了瘤细胞在体外连续增殖能力,又继承了淋巴细胞合成与分泌抗体的能力.整个流程大致包括：①动物免疫；②细胞融合；③杂交瘤筛选及单克隆化.
目前单克隆化的方法主要有两种：半固体法和有限稀释法.有限稀释法由于细胞密度低（原则上每孔一个）容易造成克隆丢失与退化,国外和国内南方的抗体技术公司偏向于用此种方法.半固体法包括甲基纤维素半固体法和琼脂糖半固体法等,国内北方的抗体技术公司主要采用甲基纤维素半固体法,比如生物外包技术联盟的成员华大蛋白质研发技术有限公司和北京爱博生生物技术有限公司.该法最早是中国协和医科大学基础医学所的陈实平教授于上世纪90年代,通过在国外学习和自主探索并加以改进,终于形成了一套成熟的抗体制备技术平台.比起有限稀释法,半固体法的优点在于操作简单,克隆不易丢失,但却容易产生双克隆,必要时还需再次单克隆化.
单克隆抗体技术自问世以来,广泛应用于基础研究、体外诊断（即IVD,ELISA试剂盒）、抗体药物、兽药残留检测、环境与食品安全监测、蛋白纯化等众多领域.但传统的杂交瘤技术存在制备周期较长,成本较高,杂交瘤细胞不稳定抗性会丢失等缺陷.近年来,随着分子生物学技术的发展,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所制备的单克隆抗体,还出现了人鼠杂交瘤技术、人人杂交瘤技术和EB病毒转化技术、EB病毒转化一杂交瘤技术,这些技术可有效解决传统杂交瘤技术所存在的问题,为单克隆抗体的应用提供更广阔的空间.
三、“红斗逢”波托斯——大鼠单抗
自从Kohler Milstein 等首次发现了分泌单抗的杂交瘤小鼠模型Balb/c - SP2/0以后,科研人员又发展了另一个大鼠模型Lou/c – IgK1b
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