如何利用转座子序列信息获得完整的目基因?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/20 02:38:58
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如何利用转座子序列信息获得完整的目基因?
转座子是染色体上一段可移动的DNA片段,它可从染色体的一个位置跳到另一个位置.当转座子跳跃而插入到某个功能基因时,就会引起该基因的失活,并诱导产生突变型,而当转座子再次转座或切离这一位点时,失活基因的功能又可得一恢复.遗传分析可确定某基因的突变是否由转座子引起.由转座子引起的突变便可以转座子DNA为探针,从突变株的基因组文库中钓出含该转座子的DNA片段,并获得含有部分突变株DNA序列的克隆,进而以该DNA为探针,筛选野生型的基因组文库,最终得到完整的基因.
转座子标签法不但可以通过上述转座突变分离基因,而且当转座子作为外源基因通过农杆菌介导等方法导入植物时,还会由于T-DNA整合到染色体中引起插入突变,并进而分离基因,因此大大提高了分离基因的效率.转座子标签法的主要步骤是：（1）采取农杆菌介导等适当的转化方法把转座子导入目标生物体,（2）转座子在目标生物体内的初步定位,（3）转座子插入突变的鉴定及分离,（4）转座子在目标生物体内的活动性能检测,（5）对转座子插入引起的突变体,利用转座子序列作探针,分离克隆目的基因.

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