如何用实验证明抗体是免疫球蛋白?求技术帝!给个大概的思路也好~动物免疫学的内容
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 02:46:04
如何用实验证明抗体是免疫球蛋白?求技术帝!给个大概的思路也好~动物免疫学的内容
如何用实验证明抗体是免疫球蛋白?求技术帝!给个大概的思路也好~
动物免疫学的内容
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做一下免疫球蛋白电泳实验吧：
免疫电泳—免疫球蛋白鉴定
免疫电泳是将电泳与双向琼脂扩散相结合的一种抗原分析方法.根据抗原中各蛋白质组分的电荷和分子量大小不同,在电场作用下有不同的迁移率,从而可将混合物中各种不同组分分开.实验时,将被检抗原样品先放在琼脂板的小孔中进行电泳分离,再在其平行方向开槽,加入已知抗体,进行双向扩散.当相应抗原、抗体比例合适时,即形成白色沉淀弧,根据沉淀弧的数量、位置和形态,即可分析样品中所含的抗原成分及其性质.
二、器材与试剂
1．器材
电泳仪、电泳槽
打孔器、挖槽刀和图形卡
载玻片、定量吸管和吸耳球
毛细管
有盖搪瓷湿盒
煮沸水浴箱
2．试剂
（1）1.2％琼脂凝胶（2）生理盐水（3）抗原（4）抗体（5）pH8.6,0.05M巴比妥缓冲液
（三）操作步骤：
用定量吸管吸取热琼脂3.5ml,平铺于载玻片上.待凝固后,按图形卡,用打孔器打孔,用针挑去孔内琼脂.
用毛细管将抗原（血清）加入小孔中,将琼脂板放入pH8.6,0.05M巴比妥缓冲液的电泳槽中,两端用四层纱布搭桥,电泳时电压可调至110V,电泳45~60分钟.
从电泳槽中取出琼脂板,用刀片按图在两孔之间挖一小槽,用针挑去槽内琼脂,在槽内加入抗抗全血清抗体.
将载玻片置于搪瓷湿盒内,进行扩散24~48小时后观察结果.
四、操作注意事项
浇载玻片时,琼脂面要尽量铺平.
加样时应一次加满,并防止样品溢出孔外.
五、实验结果记录与分析
画出各孔间的沉淀线位置、数量、形态,并予以简要的说明.
用市售抗免疫球蛋白的抗体做个Western杂交
直接有检测蛋白质的方法不就知道啦,ELASA等方法~