我想合一个双链DNA接头,但是生物公司只负责合成两个单链互补的引物,怎样才能让他们形成双链接头?求具体看文献的时候,一般都说直接退火就行了,但是我看到的文献都没有写具体的退火
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/22 19:28:35
我想合一个双链DNA接头,但是生物公司只负责合成两个单链互补的引物,怎样才能让他们形成双链接头?求具体看文献的时候,一般都说直接退火就行了,但是我看到的文献都没有写具体的退火
我想合一个双链DNA接头,但是生物公司只负责合成两个单链互补的引物,怎样才能让他们形成双链接头?求具体
看文献的时候,一般都说直接退火就行了,但是我看到的文献都没有写具体的退火时间,缓冲液体系等内容,第一次做,没有头脑额...
我想合一个双链DNA接头,但是生物公司只负责合成两个单链互补的引物,怎样才能让他们形成双链接头?求具体看文献的时候,一般都说直接退火就行了,但是我看到的文献都没有写具体的退火
不需要缓冲体系啦.你把两个单链分别溶解在ddH2O里,浓度大概是100uM就可以,然后根据用量取体积,按1:1混合,然后做退火就行了.
退火就是从90-95度开始,按照1-2°C/min的速度降至室温即可.如果有PCR仪设个程序就行了,很简单.
其实合成的时候也可以跟公司联系,要求做好退火,以duplex的形式送样品.应该是可以的.
你是要合成粘性末端的一段短的双链DNA吗?
这个合成不了吧,只能合成钝端。当然,如果,这个粘性末端两端含有酶切位点,合成了钝端,就可以用限制性内切酶切成粘性末端。
公司合成,只要是DNA片段,应该都可以合成。你给他序列就行啦。...
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你是要合成粘性末端的一段短的双链DNA吗?
这个合成不了吧,只能合成钝端。当然,如果,这个粘性末端两端含有酶切位点,合成了钝端,就可以用限制性内切酶切成粘性末端。
公司合成,只要是DNA片段,应该都可以合成。你给他序列就行啦。
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这个比较难啊,需要找到内切的内切酶,然后是连接酶。没有做过这样的,不知道是不是这样哦