RNA质量中260:若 我提的RNA是用来做RT-PCR的话,260/230的值小于2.0会有影响不?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/21 18:37:29
RNA质量中260:若 我提的RNA是用来做RT-PCR的话,260/230的值小于2.0会有影响不?
RNA质量中260:
若 我提的RNA是用来做RT-PCR的话,260/230的值小于2.0会有影响不?
RNA质量中260:若 我提的RNA是用来做RT-PCR的话,260/230的值小于2.0会有影响不?
A260nm:是核酸最高吸收峰的吸收波长,最佳测量值的范围为0.1至1.0.如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响.DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1.(请注意,这个值跟仪器无关,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常会对光有一定吸收,其值
这位童鞋讲的是用分光光度计测量RNA溶液的浓度。
260nm是核酸分子吸收峰的波长,而230nm的波长处如果出现吸收,则最有可能由苯酚等化学基团引起。由于苯酚是RNA抽提过程的常用试剂,所以260:230比值常常用来检测所得RNA溶液是否含有残留苯酚。
做RT-PCR,260/280比值较重要,不能够小于2,因为280为蛋白质吸收峰,蛋白质污染物的存在常常影响聚合酶活性 从而影响...
全部展开
这位童鞋讲的是用分光光度计测量RNA溶液的浓度。
260nm是核酸分子吸收峰的波长,而230nm的波长处如果出现吸收,则最有可能由苯酚等化学基团引起。由于苯酚是RNA抽提过程的常用试剂,所以260:230比值常常用来检测所得RNA溶液是否含有残留苯酚。
做RT-PCR,260/280比值较重要,不能够小于2,因为280为蛋白质吸收峰,蛋白质污染物的存在常常影响聚合酶活性 从而影响反应效率。但是260/230貌似没有那么坑爹,有1.7-2.0就差不多了。
楼下看起来比较专业,你听他的吧。
收起