我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 11:14:23
我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖是否都要停加,还有我想知道发酵罐进行乳糖诱导

我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有
我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?
发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有补碳源一般补什么?是葡萄糖还是甘油?

我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有
你问的问题太宽泛,要想得到满意的答复最好能具体点,比如你用的E.coli菌株、表达蛋白的一些情况、发酵规模、你想采用的工艺等等.
具体来说以下几个步骤是共有的:
1.种子(具体几级要看你的实际情况)最后一级一般接种量10%-15%
2.前期培养,根据工艺可以采用FBC或BC工艺方法,营养原则是不多不少.
3,.诱导阶段,此时以蛋白表达为主,碳源除了乳糖最好不要有其他的,氮源还是需要适当补加,另外诱导时间也是一个重要参数,这要结合你的工艺产品来确定.
4.放罐,最重要的考虑因素就是不要让菌种变衰老而自溶.
以上是我的浅见,有什么具体问题可以再探讨.

以下是我个人经验,仅作参考。因为我不知你要表达的是什么性质的外源蛋白。
1、发酵周期一般不长,48小时应该足够了。因为重组大肠杆菌的生长速度快。
2、如果是批次发酵,不用补料。此时加乳糖主要作为诱导剂,当然也不碳源和效果。
3、如果是补料批次发酵,生长进入稳定期后可补充碳源和氮源;
4、补乳糖以后,可以同时补氮源和氮源,以满足合成外源蛋白所需;
5、最好不要...

全部展开

以下是我个人经验,仅作参考。因为我不知你要表达的是什么性质的外源蛋白。
1、发酵周期一般不长,48小时应该足够了。因为重组大肠杆菌的生长速度快。
2、如果是批次发酵,不用补料。此时加乳糖主要作为诱导剂,当然也不碳源和效果。
3、如果是补料批次发酵,生长进入稳定期后可补充碳源和氮源;
4、补乳糖以后,可以同时补氮源和氮源,以满足合成外源蛋白所需;
5、最好不要补充葡萄糖,以减少葡萄糖效应的负面影响。以甘油或乳糖代之更合适。

收起

我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有 请问你做过重组大肠杆菌乳糖诱导高密度发酵么? 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导表达时,对iptg的需求有何不同 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导时,iptg的需求有何不同 在发酵乳糖中产酸不产气是不是大肠菌群?在乳糖发酵中只产酸不产气还要不要做大肠杆菌的证实实验? 大肠杆菌试验用乳糖培养基还是乳糖发酵培养基? 判断:培养基中含有乳糖,就能使大肠杆菌诱导产生利用乳糖的酶. 这句话有问题吗? 发酵大肠杆菌的发酵罐怎么选择 诱导酶与合成酶的关系大肠杆菌分解乳糖的酶是诱导酶利用乳糖的酶是合成酶?这两句话区别在哪? 【求助/交流】诱导大肠杆菌产生β半乳糖苷酶要加多少乳糖 如果培养基里出现乳糖,大肠杆菌将会产生分解乳糖的诱导酶;分解葡萄糖的组成酶会不会一直存在? 大肠杆菌测定为什么要用乳糖胆盐发酵管 乳糖操纵子诱导系统的调控模式 请高人指导一下关于细菌糖类发酵实验的结果,如下:大肠杆菌,醋酸菌,酵母菌在发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖时,各自的产酸产气情况. 大肠杆菌乳糖代谢的调控是什么 乳糖胆盐发酵管变色的就是产酸了吗做大肠杆菌实验,接种到乳糖胆盐发酵管培养24小时后,变色的就是产酸了吗? 试以大肠杆菌乳糖操纵子为例阐述原核生物酶合成诱导作用机制(答的好会追加分数) 分析动物乳腺生物反应器和以重组大肠杆菌为代表的发酵工程,那一种方式更具有优越性?