设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想请综合利用生物膜、跨膜离子的运输及生物体内能量产生等知识

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 20:15:00
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设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想请综合利用生物膜、跨膜离子的运输及生物体内能量产生等知识
设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想
请综合利用生物膜、跨膜离子的运输及生物体内能量产生等知识

设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想请综合利用生物膜、跨膜离子的运输及生物体内能量产生等知识
方法一:首先将你纯化的蛋白进行SDS-PAGE,确定得到已经纯化的蛋白的大小.如果大小与ATP合酶蛋白的标准值相近,将蛋白样品进行质谱和N端测序分析.这样得到的结果是很准确的.
方法二:设计你已经纯化出的ATP合酶的用特异性抗体,用western blot进行检测.如果你纯化的蛋白有tag的话,也可以直接用抗tag的抗体.
方法二:可以构建脂质体(liposome).将你已经纯化的蛋白插入脂质体中,脂质体外含有ADP,通过测量脂质体内部的ATP生成来确定纯化的ATP合酶是否具有功能.

跑电泳或者色谱分离,用标准品鉴定

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