动物医学类论文题目,最好与实验动物—大鼠相关的

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/25 15:41:08
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大鼠急性肾脏缺血再灌注后处理动物模型的建立
  【摘要】 目的:建立肾脏缺血后处理动物模型.方法:将40只SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(IR组)和3个缺血后处理组(IPO1,IPO2,IPO3组),分别制作动物模型.IR组在同时夹闭双侧肾动脉45 min后恢复血供,IPO1,IPO2和IPO3组在肾缺血45 min后分别采用不同的后处理方法,其中IPO3组采用反复10次再灌注20 s-缺血20 s的后处理方法.恢复血供24 h后留取各组大鼠静脉血标本及肾组织,检测肾功能指标,光镜下观察肾组织形态学变化并对肾小管损伤程度进行评分.结果:IPO3组血尿素氮为(27.9±3.2) mmol/L,血肌酐为(232±49) μmol/L,肾小管损伤程度评分为382±48.和IR组相比,IPO3组的血尿素氮、血肌酐及肾小管损伤程度评分均明显降低(P0.05).结论:在急性肾脏缺血后,采用IPO3组的方法可以减轻急性肾脏缺血再灌注损伤,从而成功建立大鼠急性肾脏IRI的后处理动物模型.
  【关键词】 缺血后处理
  0引言
  急性肾脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)是一种常见的临床病理生理过程,多见于低血容量性休克、急性肾动脉阻断以及肾脏移植等情况,可以造成急性肾衰竭或使移植肾功能延迟恢复.因此,如何有效防止因急性肾脏IRI而导致的各种急慢性肾脏疾病是一个亟待解决的问题.2000年,陶凌等[1]在国内首先证实了缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)对急性心肌缺血再灌注兔心脏具有保护作用,此后,更多研究者[2-4]把研究对象拓宽到不同物种和不同器官,建立了IPO动物模型,并对IPO保护作用机制进行了探讨.但是,肾脏IPO是否同样具有对急性肾脏IRI的保护作用尚不清楚.我们在大鼠急性肾脏IRI模型基础上,探讨建立肾脏IPO大鼠模型的方法.
  1材料和方法
  1.1材料健康雌性SD大鼠40只,体质量(236±10)g(第四军医大学实验动物中心),动物许可证号SCXK(军2002005),标准饲料喂养,正常饮水,普通光照.血尿素氮、血肌酐试剂盒(化学法)(南京建成生物工程研究所);721分光光度计(上海精密科学仪器公司);光学显微镜(日本Olympus公司).
  1.2方法
  1.2.1动物分组与模型制作将SD大鼠随机分为5组,每组8只.①缺血再灌注组(IR组):参考Basile等[5]的方法进行双侧肾脏缺血再灌注,建立缺血再灌注引起的急性肾衰竭的动物模型.将大鼠用30g/L戊巴比妥腹腔注射麻醉,去毛、固定,沿上腹部正中线逐层切开皮肤、腹直肌及腹膜,先后在结肠脾区及结肠肝区位置暴露左、右肾,游离左、右肾蒂,用玻璃分针小心分离出左、右肾动脉,然后用血管夹同时将双侧肾动脉夹闭,45 min后同时松开双侧血管夹,恢复双侧肾脏血供.②缺血后处理1组(IPO1组):各缺血后处理组的手术方法基本同IR组.在缺血45 min后用血管夹同时给予双侧肾脏反复5次的恢复血供3 min-阻断血供3 min处理(即缺血后处理),再恢复血供.③缺血后处理2组(IPO2组):在缺血45 min后用血管夹同时给予双侧肾脏反复5次的恢复血供20 s-阻断血供20 s处理,再恢复血供.④缺血后处理3组(IPO3组):在缺血45 min后用血管夹同时给予双侧肾脏反复10次的恢复血供20 s-阻断血供20 s处理,再恢复血供.⑤对照组(S组):手术方法基本同IR组,但仅分离出大鼠双侧肾动脉,不进行夹闭.
  1.2.2标本留取在末次恢复肾脏血供24 h后将大鼠用30 g/L戊巴比妥腹腔注射麻醉,固定,分离下腔静脉,用注射器采血2~3 mL,用于血液生化指标检查;然后用冰生理盐水经肾动脉对肾脏进行灌注直至肾脏发白,取下双肾,留取部分组织做光镜检查.
  1.2.3指标观察①肾功能:采用化学比色法检测血尿素氮及血肌酐.②肾脏组织形态学:部分肾组织用100 mL/L甲醛固定,常规脱水、包埋、切片后,行HE和PAS染色,光镜下观察形态,参考Paller等[6]的方法进行评分,每只大鼠肾组织随机选择10个无重叠视野(×200),每个视野下随机选择10处肾小管,共按100个肾小管计分,分数越高表示肾小管损伤程度越严重.
  统计学处理:所得数据采用x±s表示,采用完全随机设计的单因素方差分析(ANOVA),多组之间的两两比较采用LSDt检验,应用SPSS 13.0软件进行统计学处理,以P

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