如何用香蕉提取DNA希望有具体的步骤,如药品的配置用量,实验的操作方法
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 00:08:56
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如何用香蕉提取DNA
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CTAB法
其原理是:采用机械破碎植物细胞,然后加入CTAB分离缓冲液将DNA溶解出来,再经氯仿-异戊醇抽提除去蛋白质,最后得到DNA.
1.将植物组织洗净,用75%的酒精表面消毒4-5min,用去离子水冲洗3次;
2.将样品放在灭过菌的研钵中,加入液氮捣碎,迅速转入1.5ml离心管中,加入600mlCTAB(或同时加入石英砂和CTAB研磨,然后转入1.5ml离心管中);
3.65℃水浴1h(每20min反转摇匀一次);
4.加等体积的氯仿-异戊醇(体积比24:1),或加入苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),颠倒混匀;
5.6500rpm离心30min,取上清于新管中;
6.重复4,5步骤;
7.向上清中加入2倍体积的无水乙醇(或2/3体积的异丙醇)沉淀DNA,-20℃放置20min或更长时间,或过夜;
9.加75%的乙醇清洗DNA,每次12000rpm 2min,去上清;
10.风干后加入40ul的TE缓冲液溶解DNA;
11.取2ul溶液电泳检测
CTAB溶液
CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)中加入2—巯基乙醇,使终浓度达2%(V/V).将此溶液及CTAB/NaCl溶液加热至65℃.
取一小片香蕉,在碾磨碗中碾磨到很碎,然后再装在离心管去离心机离心,好象要离心好几次.具体去看看提取DNA的实验步骤吧.呵呵!
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