western blot这个技术为什么不同人做出来的结果会相差那么远呢?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/09 07:49:41
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与实验条件和每个人的实验习惯有关系.在操作规范,实验者素质较高的实验室western的结果可重复度还是很高的.
但是western毕竟是一个定性或半定量的实验,中间的很多步骤很容易造成误差.从取样,到电泳上样,转膜,封闭,加抗体,显影,每一步都会有误差.
同意楼上的回答,WB步骤很繁琐,每一个步骤稍有不慎都会影响到实验结果。
从制备样品开始,不同的人操作对样品的处理可能都会有不同。
不同的人制出来的胶都有可能不一样(玻板的清洁程度、灌胶速度和时间、插拔梳齿等)。
上样也是关键,不同的人上样习惯不一样,读数习惯也不一样,实际上样量也会不一样。
还有转膜,转膜很容易出问题,电压、电流会影响转膜就能不用说了,铺滤纸也会影响...
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同意楼上的回答,WB步骤很繁琐,每一个步骤稍有不慎都会影响到实验结果。
从制备样品开始,不同的人操作对样品的处理可能都会有不同。
不同的人制出来的胶都有可能不一样(玻板的清洁程度、灌胶速度和时间、插拔梳齿等)。
上样也是关键,不同的人上样习惯不一样,读数习惯也不一样,实际上样量也会不一样。
还有转膜,转膜很容易出问题,电压、电流会影响转膜就能不用说了,铺滤纸也会影响转膜效率。
还有之后的封闭、孵一抗等等。
但是,如果是一个实验室,按照实验室的操作习惯规范操作,重复性是可以保证的。
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我想知道Western Blot技术的应用及意义是什么
什么是Western Blot?
western blot的具体步骤?