请问你是如何解决trizol法提RNA中的DNA污染?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/16 15:43:16
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请问你是如何解决trizol法提RNA中的DNA污染?
要除RNA中的DNA最常用的是DNA酶1,很多公司有买的.但是我们用过发现效果并不好,因为你消化DNA的时候对RNA还是有影响的,所以我不建议这么做.你最好在如何更好的提取RNA上做文章,提高RNA的纯度.另外做RT-PCR时有一点DNA的污染其实影响不大,而且往往是难免的,关键是没后面的PCR设计好了,应该是没有问题的.

NaCl沉淀法可以析出DNA

RNA用70%或75%乙醇沉淀后，离心去上清，加入30～50ulDEPC水溶解，如何加入DNA酶1(10U/ul)混匀，37摄氏度温育30分钟就可以去除DNA了。

建议使用试剂盒提取，宝公司、甚至上海生工的总RNA盒子都宣称不会含gDNA污染。如果是用来做RT，少许gDNA污染关系不大，定量PCR的话DNase I处理是必须的。

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