食品车间设备菌落总数怎么测定 标准是什么?

食品车间设备菌落总数怎么测定 标准是什么?
食品车间设备菌落总数怎么测定 标准是什么?

食品车间设备菌落总数怎么测定 标准是什么?
SN/T 1897-2007食品中菌落总数的测定也可以用于与食品接触的设备表面的.附录A.
　　另有自定的
　　例一：
　　物体表面采样及检查方法
　　采样面积
　　被采表面＜100cm2,取全部表面；被采表面≥100cm2,取100cm2.
　　采样方法
　　用5×5cm2的标准灭菌规格板；放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次；并随之转动棉拭于.连续采样1～4个规格板面积；剪去手接触部分,将棉拭于放入装10ml采样液的试管中送检.门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样.
　　培养（略）
　　例二：
　　空气及与食品接触面微生物检验方法、检验标准
　　1、 目的：
　　检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标,生产区域环境当中病原微生物的监控,达到规定标准,以控制食品成品的质量.
　　2、 参照标准：
　　中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1－2000、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、 出入境检验检疫局二000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法.
　　3、 采样与检测方法：
　　3.1空气的采样与测试方法
　　3.1.1样品采集：
　　(1)取样频率：
　　a)车间转换不同卫生要求的产品时,在加工前进行采样,以便了解车间卫生清扫消毒情况.
　　b)全厂统一放长假后,车间生产前,进行采样.
　　c)产品检验结果超内控标准时,应及时对车间进行采样,如有检验不合格点,整改后再进行采样检验.
　　d)实验性新产品,按客户规定频率采样检验.
　　e)正常生产状态的采样,每周一次.
　　（2）采样方法
　　在动态下进行,室内面积不超过30 m2,在对角线上设里、中、外三点,里、外点位置距墙1 m；室内面积超过30 m2,设东、西、南、北、中五点,周围4点距墙1 m.采样时,将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度),并避开空调、门窗等空气流通处,打开平皿盖,使平板在空气中暴露5 min.采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h,若样品保存于0～4℃条件时,送检时间不得超过24h.
　　3.1.2菌落培养：
　　（1）在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置37℃±1℃ 培养24 h,取出检查有无污染,将污染培养基剔除.
　　（2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室,细菌总数于37℃±1℃培养48h观察结果,计数平板上细菌菌落数.
　　（3）菌落计算：
　　a) 记录平均菌落数,用“个/皿”来报告结果.用肉眼直接计数,标记或在菌落计数器上点计,然后用5～10倍放大镜检查,不可遗漏.
　　b) 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2 个或2个以上菌落计数.
　　3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法：
　　3.2.1样品采集：
　　(1)取样频率：
　　a)车间转换不同卫生要求的产品时,在加工前进行擦拭检验,以便了解车间卫生清扫消毒情况.
　　b)全厂统一放长假后,车间生产前,进行全面擦拭检验.
　　c)产品检验结果超内控标准时,应及时对车间可疑处进行擦拭,如有检验不合格点,整改后再进行擦拭检验.
　　d)实验新产品,按客户规定擦拭频率擦拭检验.
　　e)对工作表面消毒产生怀疑时,进行擦拭检验.
　　f)正常生产状态的擦拭,每周一次.
　　（2） 采样方法：
　　a) 工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取与食品直接接触或有一定影响的表面）取25cm2 的面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检.
　　b) 工人手：被检人五指并拢,用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面,从指尖到指端来回涂擦10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检.
　　（3）采样注意事项：
　　擦拭时棉签要随时转动,保证擦拭的准确性.对每个擦拭点应详细记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间
　　3.2.2 细菌•大肠菌群的检测培养:
　　样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇.此液为1：10稀释液.如污染严重,可十倍递增稀释,吸取1ml 1：10样液加9ml无菌生理盐水中,混匀,此液为1：100稀释液.
　　3.2.2.1 细菌总数：
　　（1）以无菌操作,选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿（平行样）,将已融化冷至45℃左右的平板计数琼脂培养基倾入平皿,每皿约15ml,充分混合.
　　（2）待琼脂凝固后,将平皿翻转,置36℃±1℃ 培养48 h后计数.
　　（3）结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落数
　　3.2.2.2大肠菌群：
　　（1）平板法:
　　a) 以无菌操作,选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿（平行样）,将已融化冷至45℃左右的去氧胆酸盐琼脂培养基倾入平皿,每皿约15ml,充分混合.待琼脂凝固后,再覆盖一层培养基,约3-5 ml.
　　b) 待琼脂凝固后,将平皿翻转,置36℃±1℃ 培养24h后计数.
　　c) 结果计算： 以平板上出现紫红色菌落的个数乘以稀释倍数得出.
　　d) 结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落数
　　（2）试管法:
　　a) 以无菌操作,选择3个稀释度各取1ml样液分别接种到BGLB肉汤培养基中,每个稀释度接种三管.
　　b) 置BGLB肉汤管于36℃±1℃培养48±2h.记录所有BGLB肉汤管的产气管数.
　　c) 结果报告：按BGLB肉汤管产气管数,查MPN表报告每25cm2食品接触面中或每只手的大肠菌群值.
　　3.2.3 金黄色葡萄球菌检测
　　（1）定性检测
　　a) 取1ml 稀释液注入灭菌的平皿内,倾注15-20ml的B-P培养基,（或是吸取0.1稀释液,用L棒涂布于表面干燥的B-P琼脂平板）,放进36±1℃的恒温箱内培养48±2小时.
　　b) 从每个平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌的菌落作血浆凝固酶实验.
　　c) 结果报告：B-P琼脂平板的可疑菌落作血浆凝固酶实验为阳性,即报告手（工器具）上有金黄色葡萄球菌存在.
　　（2）定量检测
　　a) 以无菌操作,选择3个稀释度各取1ml样液分别接种到含10％氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤培养基中,每个稀释度接种三管.
　　b) 置肉汤管于36±1℃的恒温箱内培养48小时.划线接种于表面干燥的B-P琼脂平板,置36℃±1℃ 培养45～48小时.
　　c) 从B-P琼脂平板上,挑取典型或可疑金黄色葡萄球菌菌落接种肉汤培养基,36℃±1℃培养20～24小时.
　　d) 取肉汤培养物做血浆凝固酶试验,记录试验结果.
　　e) 报告结果：根据凝固酶试验结果,查MPN表报告每25 cm2食品接触面中或每只手的金黄色葡萄球菌值.
　　3.3工厂环境中病原体的检测计划与方法
　　检测计划：为了保证食品安全,工厂应该对生产环境中的病原微生物进行检测和评估,检测项目包括李斯特菌,沙门氏菌等病原体微生物,化验室应该按照一定的计划对生产场所环境中的病原体进行检测,其中包括地面、下水道、 排水沟、墙壁、天花板、设备框架、运输的支架,冷藏装置、速冻机、传送带、设备的螺丝、维修工具等部位.当某个点检测到病员微生物时,应该对环境中的相似点加大检测频率；在把所有的预定点检测完后,应该对环境中的病原微生物的存在状况进行全面评估,在下一次环境检测循环过程中加强检测容易出现病原体的环境点,达到持续改进的目的.
　　检测频率: 每月两次,每次每个区域至少选取5个检测点,分别进行检测.
　　3.3.1 环境李斯特菌的检测方法（3MTM PetrifilmTM 环境李斯特菌的测试片）
　　3.3.1.1 用涂抹棒,海绵或者其他采样设备收集环境样本.
　　3.3.1.2 将收集的样本添加10毫升灭菌的缓冲蛋白胨水,将样本与缓冲蛋白胨混合1分钟,将样品置于室温（20-30℃）1小时,最久不超过1.5小时,以修复损伤的李斯特菌.
　　3.3.1.3 将测试片放在平坦处,掀起上层膜.
　　3.3.1.4 用移液器垂直滴加3毫升样品到下层膜中央,将上层膜缓慢盖下,以免产生气泡.
　　3.3.1.5 轻轻将塑料压板放在位于接种区上层膜上,不要压,扭转或者滑动压板.提起压板等至少十分钟,以使胶体凝固.
　　3.3.1.6 将测试片透明面朝上,可叠放至十片,在37℃±1℃培养26-30小时,可以用标准菌落记数器或者其他光学放大器判读,不要记数圆形轮廓上的菌落,因为他们不受选择性培养基的影响.
　　3.3.1.7 对于定性检测,根据紫红色菌落是否存在,结果记为检出或者未检出.
　　3.3.2 环境中沙门氏菌的检测方法
　　3.3.2.1采样地点: 选取采样点时因尽量选取微生物容易滋生的地方
　　3.3.2.2 操作步骤
　　3.3.2.2.1采样应在生产开始后进行,用已浸润过的棉拭在选定的被测表面旋转涂抹约100cm2的面积,然后将棉拭放回涂抹试管并盖紧.
　　3.3.2.2.2将样品带回实验室,每5个点混合成一个样品, 登记编号,按照SN0170-92标准及时检测,若有阳性结果出现,应逐步对所混合的每个点分别检测.