分离和提纯蛋白质的方法
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/30 15:42:54
分离和提纯蛋白质的方法分离和提纯蛋白质的方法分离和提纯蛋白质的方法1.前处理把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来,保持原来的天然状态,并不丢失生物活性.常用的方法:匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处
分离和提纯蛋白质的方法
分离和提纯蛋白质的方法
分离和提纯蛋白质的方法
1. 前处理
把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来,保持原来的天然状态,并不丢
失生物活性.常用的方法:匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等.
超声波破碎法:当声波达到一定频率时,使液体产生空穴效应使细胞破碎的技术.超声波引起的快速振动使液体局部产生低气压,这个低气压使液体转化为气体
,即形成很多小气泡.由于局部压力的转换,压力重新升高,气泡崩溃.崩溃的气泡产生一个振动波并传送到液体中,形成剪切力使细胞破碎.
2. 粗分级
分离可用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法.这些方法的特点是简便、处理量大,
3. 细分级
样品的进一步纯化.样品经粗分离以后,一般体积较小,杂蛋白大部分已被除去.进一步纯化,一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等.必要时还可选择电泳、等电聚焦等作为最后的纯化步骤.
结晶是最后的一步
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蛋白质分离提纯的方法,已知某种生物材料,含有一种功能蛋白质,这种蛋白质的等电点为5.6,分子量为30000,根据此设计实验方案把它分离提纯出来.