感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来 做克隆实验,目的基因与pGEM-T Easy Vector连接后,和JM109感受态细胞培养,然后培养液在LB+氨卞青霉素+IPTG+X-Gal培养基上37度培养,结果没有长出来任何菌落.

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/20 02:40:39
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感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来 做克隆实验,目的基因与pGEM-T Easy Vector连接后,和JM109感受态细胞培养,然后培养液在LB+氨卞青霉素+IPTG+X-Gal培养基上37度培养,结果没有长出来任何菌落.
感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来
做克隆实验,目的基因与pGEM-T Easy Vector连接后,和JM109感受态细胞培养,然后培养液在LB+氨卞青霉素+IPTG+X-Gal培养基上37度培养,结果没有长出来任何菌落.蓝、白斑都没有.请教可能是什么原因呢?我自己只想到有可能是感受态细胞失活,请问还有其他什么原因吗,我想多试一试!

感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来 做克隆实验,目的基因与pGEM-T Easy Vector连接后,和JM109感受态细胞培养,然后培养液在LB+氨卞青霉素+IPTG+X-Gal培养基上37度培养,结果没有长出来任何菌落.
首先,确保你的连接是成功的,碰到过有师弟没加连接酶,连接失败的情况;
其次,转化过程操作是否正确,看你写的东西,连接液和感受态放在一起培养是个什么情况?
第三,如果要检测感受态是否失活,在第二步确保无误码的情况下,转化时加入阳性对照,拿个纯质粒同时转,如果纯质粒都不长,那感受态必然有问题.

感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来 做克隆实验,目的基因与pGEM-T Easy Vector连接后,和JM109感受态细胞培养,然后培养液在LB+氨卞青霉素+IPTG+X-Gal培养基上37度培养,结果没有长出来任何菌落. 感受态细胞效价检测没有出来菌落,是怎么回事? 为什么我制作感受态细胞平板上面什么都没有?连杂菌都没有? 感受态细胞的制备及转化平板上菌落的多少跟什么原因相关 做蓝白斑筛选为什么不长菌?最近做蓝白斑筛选时,平板上一点菌落都没有长出来,不知道什么原因.操作过程应该问题不大,已经成功做过很多次.怀疑是感受态的问题,放在-80度保存了二个多月, 平板计数琼脂做细菌培养,却一个菌落群都没有!什么原因 为什么感受态细胞没有细胞壁? 为什么平板划线法和涂布平板法都可以获得单菌落 本人新手,连接产物转化时,流程上都是说200微升感受态细胞10微升连接产物,能不能用5微升连接产物与100微升感受态细胞混合,效果怎么样,同学说不用蓝白斑筛选,长出来的单菌落大都是连接成 制备大肠杆菌感受态细胞,OD600已经大于0.3,没有超过0.5,但是离心没有沉淀,1.平板划线,36℃过夜培养2.挑单菌落接至2mlLB液体培养基,36℃,100rpm振荡过夜培养3.取过夜培养的菌液100μL,转接至10mlLB液 大肠杆菌转化后长得很慢,提质粒跑电泳条带很淡我是用的一种基因缺陷性大肠杆菌做感受态,然后将连接好的质粒转入(连好的质粒里含有缺少的基因片段),涂平板以后需要24h才有菌落长出,挑 在去氧胆酸盐平板上长的大肠菌群菌落,没有明显的沉淀环,菌落也很小.不知算不算大肠菌群 各种感受态细胞有什么区别、用途? 稀释涂布平板法结果是在培养基表面有单个细胞形成单个的菌落.这句话为什么错、 菌落计数法和稀释涂布平板法有什么区别? 转化的大肠杆菌菌落周围为什么长出好多小菌落我做的大肠杆菌转化,涂平板培养了二十几个小时,有的菌落外面有些小菌落,后来平板放在4度冰箱,几乎每个菌落周围都长出了很多的小菌落,是 cacl2法制感受态细胞:最近用此法制备感受态细胞,但是转化后的效率很低,几天看看平白机会一个没有长.哪位大侠讲讲经验呀,制备感受态细胞及转化时应特别注意什么,好像它们好脆弱,懂不 平板菌落如何计数