RNA提取原理RNA提取时,加氯仿后分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA）,中间白色薄层（应该是蛋白和DNA）,下层有机相（氯仿和蛋白等）有几个疑问：1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/24 08:52:40
RNA提取原理RNA提取时,加氯仿后分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA）,中间白色薄层（应该是蛋白和DNA）,下层有机相（氯仿和蛋白等）有几个疑问：1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可
RNA提取原理
RNA提取时,加氯仿后分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA）,中间白色薄层（应该是蛋白和DNA）,下层有机相（氯仿和蛋白等）
有几个疑问：
1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可溶于水.那DNA也应该和RNA一样主要溶于上层水相吧?
2.蛋白属有机物,应溶于下层有机相吧
3.既然DNA溶于水相了,蛋白溶于有机相了,那中间的白色薄层又是什么?
4.氯仿是重质有机溶剂,所以比水重,在下层.那如果白色中间层是DNA和蛋白,DNA和蛋白是大分子,应该比氯仿重才对,即白色中间层应在有机相的下面才对,怎么在中间呢?
如果能让我完全明白会额外给20分.
5.下层有机相除氯仿外还有什么？
附：上清不含DNA的原因：
1.因为细胞中存在DNA酶，在提取之前细胞破碎的时候没有加DNA酶抑制剂，DNA已经被分解了。
2.上层水相，PH 5.1左右，当溶液pH在酸性的时候，DNA分子就会沉淀在酚与溶液的界面，只有RNA分子留在水相。而当pH接近中性时，DNA就会溶解在水相，（导致PH中性的大概原因是trizol与样品比例不对，应该尽量保证提取量的前提下使trizol过量）
RNA提取原理RNA提取时,加氯仿后分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA）,中间白色薄层（应该是蛋白和DNA）,下层有机相（氯仿和蛋白等）有几个疑问：1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可
蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质.
我们做过提取DNA的实验,用的是饱和酚提取的,后来又用了氯仿的.DNA、RNA很容易被分解,特别是RNA,RNA酶到处都有,我们在做DNA提取时用到EDTA抑制DNA酶的活性,防止被降解.
分层不是看分子的大小的,看它在离心力的作用下运动的快慢,一般密度大的运动的快一些在下面.
下层有机相中有一些脂类
DNA不是单独存在于细胞中的，是染色体
蛋白质是有机物没错，但是它是复杂的有机物，有亲水基，疏水基，所以不是只要是有机物就溶于有机溶剂的
分层看的是密度，不是分子量的大小