?用高效价的感受态细胞挑单克隆,严格按照hanahan法制备感受态细胞.测效价完全长不出菌落的原因?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/02/01 20:48:44
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hanahan的方法没有问题
一般是两个原因(排除你板子和试剂的原因,当然你也要确认一下)
1.hanahan的方法对OD值的要求特别高(差几分钟就差一个数量级),如果这个方面出了问题,感受态的效率会呈指数下降.
2.因为测效价的质粒浓度非常低,一般为10pg/ul,这个浓度的质粒反复冻融一两次后,基本上里面的质粒就已经降解了,需要重新稀释.
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