求不连续的密度梯度血浆-Percoll离心法操作步骤

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/20 04:34:20
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求不连续的密度梯度血浆-Percoll离心法操作步骤
求不连续的密度梯度血浆-Percoll离心法操作步骤

求不连续的密度梯度血浆-Percoll离心法操作步骤
博凌科为生物科技-为你不连续的密度梯度血浆-Percoll离心法1)先制备Percoll储存液:Percoll原液(100%):0.9%NaCl的体积比为9:1.2)取一50ml聚乙烯管,无菌采集人外周静脉血,加4.4ml3.8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml.上述全血300gX20min,离心,室温.3)吸出富含血小板的上清,2500gX15min,制备无血小板血浆(platelet-poor Plasma,PPP).4)余下的沉降全血加入5ml 6%Dextran (分子量500,000,用无菌生理盐水配制),并用生理盐水(0.9%)调节最终体积至50ml,轻轻、彻底混匀.室温沉降30min.5)吸出富含白细胞的上层液,275gX6min.6)沉淀的细胞用2~3mlPPP重悬7)在一15ml离心管中依次加入2ml42%、2ml51%Percoll(均为用PPP新 鲜配制)、2~3ml细胞悬液,275gX10min.8)单个核细胞及部分血小板位于血浆与42%Percoll液之间,中性粒细胞位于42%Percoll与51%Percoll之间.血小板可通过 25%Percoll离心5min去除,也可在原密度梯度中加入第三个25%Percoll一起离心去除.9)中性粒细胞层用PPP液冼1次,再用含糖的Krebs-Ringer磷酸缓冲液(KRPD,PH7.23)洗1次.10)用这种方法可得80%中性粒细胞,纯度在95%以上.

求不连续的密度梯度血浆-Percoll离心法操作步骤 请问percoll连续梯度怎么配制?比如15%---75%的percoll连续梯度.急用!谢谢您的回答.但是按照您的方法配制出来的是非连续梯度,比如20%,40%的梯度等,但是如果要配15%---75%的连续梯度怎么办呢? 密度梯度超速离心法可将血浆脂蛋白分成哪几类,试述每类血浆脂蛋白的合成部位,组成 叶绿体悬浮液加到percoll梯度上(40%/80%),离心后不分层不分层叶绿体悬浮液加到percoll梯度上(40%/80%),16000g和8000g离心后都不分层不分层,但是3000g时会分层,只是扩散现象比较严重是什么原因 做蔗糖密度梯度时,开始不同浓度的界面很明显,但一会界面很模糊,还能够用不? 血浆蛋白质中密度最高的是什么 梯度下降法求极值和直接求导求极值的区别在哪?求函数极值的时候有所谓的梯度下降法.那为什么不直接令梯度(即函数的导数)为零得到极值呢?梯度下降法不是也要反复求导迭代后取得收 人血浆密度是多少 氯化铯密度梯度是怎么回事?为什么在同一管溶液中还存在不同的密度区?这个“密度梯度”指的是什么? 用sobel求图像梯度,图像的边角处的梯度怎么处理? 不连续的函数怎么求极限 求气温和密度的关系、气温和气压的关系、成云致雨的条件、风形成的直接原因、水平梯度力特点 已知一星体每隔4.4×10∧-4s向地球发出一次电磁脉冲(这个星体因为高速旋转,才使得电磁波是不连续的),求这个星体的最小密度,我觉得最小密度有用但却不知道有什么用.谁会的做一下,不 梯度pcr的梯度设置作用是什么? 求血浆里的各种成分越全越好. 求血浆蛋白和红细胞的关系 血浆蛋白的合成为什么不是在人体内环境发生的?血浆蛋白不就是位于血浆内吗 求最大值时,遗传算法相对梯度算法的优势