植物组织培养操作的过程如何操作,需要什么器材例如：超净工作台,无菌室中如何操作.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/16 17:51:03
植物组织培养操作的过程如何操作,需要什么器材例如：超净工作台,无菌室中如何操作.
植物组织培养操作的过程
如何操作,需要什么器材
例如：超净工作台,无菌室中如何操作.
植物组织培养操作的过程如何操作,需要什么器材例如：超净工作台,无菌室中如何操作.
组培室标准操作程序
一 生产环境
1 工作人员进入组培室必须穿工作服,包括更换拖鞋、穿白大褂,接种人员还要带帽、带口罩.
2 所有人员在组培室内不准高声喧哗、打闹.
3 工作期间,各生产房间要关闭房门,尤其是接种间；工作人员出入要随手关门.
4 各种生产用品要安固定的位置排放整齐,不可乱拿乱放.
5 工作过程中所产生的垃圾要及时清理,尤其是接种间,其内垃圾停留时间不得超过4小时.
二 接种程序
1.准备工作：接种人员在正式接种之前要做好准备工作,包括准备酒精灯、新洁尔灭、灭菌用脱脂棉以及准备接种工具、分取培养基、接种用苗和工作台灭菌等.
·酒精灯用工业酒精作燃料,而非75%酒精.
·工作台上用的新洁尔灭浓度是0.1%,而非0.01%.
·工作台灭菌包括两步：一是上台前用紫外灯照射30分钟,二是正式接种前再用新洁尔灭仔细擦一遍.
·培养皿的取放：从布包里取培养皿时,一定要注意,手不能接触培养皿的边沿,同时要尽可能减少与培养皿的接触面,一般规定只能用双手的拇指和食指取放.
·接种工具灭菌也分两步,一是用灭菌布包裹好,在高压锅里灭一次,这一步由灭菌人员负责完成；二是在工作台上,从布包里取出后,先用酒精擦拭一下,再放在酒精灯火焰上灼烤一遍,其要求是工具的每一点在火焰上灼烤时间不得少于5秒钟.在工具灭菌之前,工作人员的手部,包括手腕,都要用酒精仔细擦拭一遍.
2 接（转）苗：包括取苗、切苗和接苗三步.
·取苗：先解开培养瓶的瓶盖（封口膜）,如果不能一次取出其内的全部材料,要先把封口膜（瓶盖）口对者风源放在酒精灯的左前方,然后把瓶口在酒精灯上烤7～10秒；正式取苗时,瓶口不要斜向外；一次取苗不可太多,以免风干.
·切苗：培养皿放在离风窗10～20厘米处,不可太往外；镊子和手术刀都不可太热,最好是凉的,且在操作过程中,刀和镊都要培养皿斜上方操作,不可在其正上方操作；在切苗过程中产生的垃圾可堆放在培养皿内的一侧位置上,若非迫不得已,不可弄到培养皿外.
·接苗：培养瓶盖（或封口膜）的放置方法和及瓶口灼烤方法与取苗时的相同,烤完瓶口后,要先倒掉瓶内多余的水分,然后在接苗；接苗时,镊子最好不要与瓶口接触,一瓶内一般接5～6棵苗,不要放得太多；组培苗在瓶内要排放均匀、整齐、美观.
·封口、记录：封口膜要及时捆绑,其松紧度以用手转不动为准；下台前要把品种代号、培养基类型、个人编号以及接种日期标示到瓶上.离开之前还要把工作台收拾干净,把接种过程中产生的垃圾清理掉,台上的物品也要摆放整齐.
三 组培苗的管理
1.瓶苗要整齐的摆放在自己的组培架上,不可乱放.
2.接种人员每天都要统计自己的接种数量,包括转前瓶数和转后瓶数.
3.值日人员要定时开灯、关灯,保证组培苗有足够的光照时间,但也不可过长,以每天14小时左右为宜.
四 接种用具的清洗
1.洗刷培养瓶、培养皿：第一步：把培养瓶培养皿放入洗洁净溶液里,先用毛刷清洗内部,再用钢丝球把外面的字清洗掉.第二步：把他们再用清水冲洗3-5遍.第三步：把瓶内的积水倒掉,倒放在准备台,准备台上要先放一层纱布.这一步的清洁标准是：凉干的瓶壁（器皿）内外无明显的斑点、污迹.
2.洗涮镊子：用洗洁精浸泡五分钟,用钢丝球打磨一下然后放入清水冲洗三遍.
五 灭菌
1.对污染苗灭菌：一经发现就随即灭菌处理,大量的进行高压灭菌,少量的加入工业酒精在室外进行处理.
2.室内空气灭菌：每四周用高锰酸钾和甲醛对室内空气灭一次菌.
3.室内地面：每2－3天用新洁尔灭拖一遍地.
4.卧式和手提式高压灭菌锅使用程序：严格按使用说明书操作.