电泳实验中什么叫上样缓冲液?WESTERN BLOT 中需要进行电泳,其具体的各个缓冲液的作用是什么尤其是上样缓冲液
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/22 18:34:23
电泳实验中什么叫上样缓冲液?WESTERN BLOT 中需要进行电泳,其具体的各个缓冲液的作用是什么尤其是上样缓冲液
电泳实验中什么叫上样缓冲液?
WESTERN BLOT 中需要进行电泳,其具体的各个缓冲液的作用是什么尤其是上样缓冲液
电泳实验中什么叫上样缓冲液?WESTERN BLOT 中需要进行电泳,其具体的各个缓冲液的作用是什么尤其是上样缓冲液
楼上的博士啊,人家用的是蛋白上样缓冲液,不是核酸电泳缓冲液.
PAGE分离蛋白所用缓冲液一般使用Tris,溴酚蓝以及甘油；也可使用TBE,加入溴酚蓝和甘油.还可加入少量DTT和巯基乙醇.
作用主要是标记和指示电泳程度,还有给试样染色,便于加样.
①在电泳中形成肉眼可见的指示带，可测电泳的速度和位置。
②使样品呈色，使加样操作更方便。
http://www.shinegene.org.cn/tools/sg045.pdf
这是一个pdf文档的链接，其中详细讲解了你所关心的问题，希望能够对你有所帮助。
缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应（4OH--4e->2H2O+O2)，负极发生的是还原反应（4H++4e->2H2)，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，是溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性，以利于DNA分子的迁移，例如，一般电泳缓冲液中应含有...
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缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应（4OH--4e->2H2O+O2)，负极发生的是还原反应（4H++4e->2H2)，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，是溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性，以利于DNA分子的迁移，例如，一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子，Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢；太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA，加入浓度为1-2mmol/L，目的是螯合Mg2+ 等离子，防止电泳时激活 DNA酶，此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
TBE的特点是缓冲能力强，长时间电泳时可选用TBE，并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用，并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收电泳中使用。
TPE的缓冲能力也较强，但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出，所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。
收起
染色标记用的