纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧?如题,因为要P一段大约5-6kb的cdna片段,我在想合成cDNA的第二条链,然后纯化,这样应该更好P一些吧?求问大虾?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/29 03:06:17
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纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧?
如题,
因为要P一段大约5-6kb的cdna片段,我在想合成cDNA的第二条链,然后纯化,这样应该更好P一些吧?
求问大虾?

纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧?如题,因为要P一段大约5-6kb的cdna片段,我在想合成cDNA的第二条链,然后纯化,这样应该更好P一些吧?求问大虾?
我觉得应该没啥区别吧 毕竟95度之后双链的就变成单链的了 而第一个循环之后 单链的也变成双链了 P这种长片段的话关键还是得用高保真的酶 否则很容易有突变 也可以分段P再连起来

RNA提取不容易，得到的cDNA浓度也很低啊，你一纯化有可能都丢了。按照经典的做法，做完反转录后，直接做PCR吧。
理论上讲当然是纯化一下的好了，可实验操作性不强。

纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧?如题,因为要P一段大约5-6kb的cdna片段,我在想合成cDNA的第二条链,然后纯化,这样应该更好P一些吧?求问大虾? cDNA是dna单链? cDNA的详细介绍? cDNA合成时的方向性是如何实现的?我只从书中查到：cDNA两端加上不同RE所识别的接头序列,保证所得双链cDNA的方向性.具体方法是怎样的?原理又是什么? cDNA能存放多久请问cDNA在-80°C冰箱能存放多久?我的cDNA是经反转酶和消化酶作用后的单链DNA,在-80°C冰箱放了半年,中间有六-七次反复冻融,请问还能用么?另外,如何证明这些cDNA已经降解了?跑电 从部分DNA文库中提出的 CDNA 是单链还是双链? 如何从cdna文库提取目的基因为什么提取的时候要用一段核苷酸链? cDNA是干什么用的 mRNA反转录中使用olig（t）18做引物所得到的是单链cDNA吗?如果是的话如何才能得到双链的cDNA啊?再麻烦各位大虾们，反转录所得的cDNA为什么不能用琼脂糖凝胶加EB溶液进行直接检测呢？既然RNA 基因组文库和cDNA文库的区别 基因组文库与CDNA的区别 cDNA文库与基因组文库的区别 cDNA感染性克隆的概念和原理 基因组与全长cDNA的关系 cDNA文库和部分基因文库的区别cDNA文库就是部分基因文库吧? cDNA是双链么real time PCR为何用cDNA 而不是用直接提取的DNA做 噬菌体cDNA文库或质粒的cDNA文库可以用于酵母双杂么 有关cDNA的保存cDNA在-20℃可以保存多久?