实验活细胞与活细胞怎样区别
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 18:16:08
实验活细胞与活细胞怎样区别
实验活细胞与活细胞怎样区别
实验活细胞与活细胞怎样区别
是活细胞与死细胞的区分吧?一般是通过染色,下面是以酵母举例,具体的细胞类型可以查找相关文献,可以搜到的
基本原理
酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物,细胞核与细胞质已有明显的分化,菌体比细菌大.繁殖方式也较复杂,无性繁殖主要是出芽生殖,仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子.本实验通过用美蓝染色制成水浸片,和水-碘水浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式.美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对酵母的活细胞进行染色,由于细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色,而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色.因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞.但美蓝的浓度、作用时间等均有影响,应加注意.
器材
酿酒酵母或卡尔酵母（Saccharomyces calsbergensis）；
0．05％、0．1％吕氏碱性美蓝染液,革兰氏染色用的碘液；
显微镜,载玻片,盖玻片等.
操作步骤
1．美蓝浸片观察
(1)在载玻片中央加一滴0．1％吕氏碱性美蓝染液,液滴不可过多或过少,以免盖上盖玻片时,溢出或留有气泡.然后按无菌操作法取在豆芽汁琼脂斜面上培养48小时的酿酒酵母少许,放在吕氏碱性美蓝染液中,使菌体与染液均匀混合.
(2)用镊子夹盖玻片一块,小心地盖在液滴上.盖片时应注意,不能将盖玻片平放下去,应先将盖玻片的一边与液滴接触,然后将整个盖玻片慢慢放下,这样可以避免产生气泡.
(3)将制好的水浸片放置3分钟后镜检.先用低倍镜观察,然后换用高倍镜观察酿酒酵母的形态和出芽情况,同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞.
(4)染色半小时后,再观察一下死细胞数是否增加.
(5)用0．05％吕氏碱性美蓝染液重复上述的操作.
2．水-碘浸片观察
在载玻片中央滴一滴革兰氏染色用的碘浓,然后再在其上加三滴水,取酿酒酵母少许,放在水-碘液滴中,使菌体与溶液混匀,盖上盖玻片后镜检.