植物材料和动物材料在制备染色体标本过程中的区别
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/18 21:39:38
植物材料和动物材料在制备染色体标本过程中的区别
植物材料和动物材料在制备染色体标本过程中的区别
植物材料和动物材料在制备染色体标本过程中的区别
植物
1 材料与方法
1.1 供试材料 试验用植株由校园内采集.
1.2 根尖制片
1.2.1 常规压片 通常是在早上9-10点采集葱兰的根然后在室温下放入0.1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h.然后就在常温把材料放在卡诺氏固定液下固定10m,接下来就在1 mol／L盐酸溶液中解离到松软刚合适为止.最后是用蒸馏水将葱兰根冲洗干净,这样前处理就结束.处理完后就可以用醋酸洋红染色或改良苯酚品红染色[4].压片/涂片后选取典型的染色体,在40倍物镜及油镜下显微照相.
1.2.2 去壁低渗法 去壁低渗法也是把材料放0.1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h.然后前低渗即是将根尖放在0.075 tool／L KCI低渗液中,在20～25℃条件下处理0.5h.接下来就是最关键的去壁,倒去KCI溶液,加入2.5％混合酶液,在25～30℃温度下处理2～5 h左右.去壁后要进行后低渗,使细胞完全胀,即是用20～30℃蒸馏水慢慢冲洗2～3次后,再将根尖放在0.075 tool／L KCI低渗液中处理.
动物
1)动物的选择,一般用小鼠,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其分裂指数较高,不用体外培养就可以得到分裂中期的细胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解.
3) 低渗处理很关键.低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关.低渗过度,细胞会破裂；低渗不足则染色体在一起,分散不开.
4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备.离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂；反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失.
5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响.
6) 载玻片要预冷.冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展.
7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失.
8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂；过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量.
结构不同，植物材料中的纤维起很大作用
若我没有记错的话，植物的要先用纤维素酶处理，除去纤维素支架。