氨基酸纸层析为什么会出现拖尾现象
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/23 09:18:35
氨基酸纸层析为什么会出现拖尾现象
氨基酸纸层析为什么会出现拖尾现象
氨基酸纸层析为什么会出现拖尾现象
究其原因,经自己多次亲手操作,多次反复对比,始悟出一些道理,叙述如下：拖尾现象是指展层,显色后在层析分配图上,所看到的某一种氨基酸的分子位移,不是如标准图谱所示的那样,完整地显示在某一位置上,而是形成象笤帚似的那样,前端粗圆而逐渐细小下来,宛如拖着一个尾巴.其图所呈颜色也是由浓渐淡.其图象的出现,原认为是在实验中,对影响Rf值的主要因素要求,掌握不够所致.诸如,物质结构与极性对Rf值的影响,层析溶剂对Rf值的影响,PH对Rf值的影响(溶剂、滤纸和样品的PH值),温度对Rf值的影响,滤纸的质地是否均匀,薄厚是否适当,纤维的松紧度是否适中等对Rf值的影响,展层的方式(上行、下行)对Rf值的影响.然而在多次实验过程中无论怎佯严格遵循其影响Rf值的主要因素的要求,都仍不可避免地要出现拖尾现象.此时,这就需要从具体操作规范方面,诸如样品的处理,点样、展层、显色等几个操作程序去考虑思索,经仔细分析,样品的处理是为除去杂质纯化样品,达到层析分配某氨基酸的情晰显色图像；展层过程是在上述影响Rf值的主要因素要求下
进行,使样品达到一个适当的位移,便于在显色后从图象上,区分不同样品的氨基酸；显色是在用配制好的,与水不相混合,并挥发性较快的 邑剂喷雾后迅速吹干的.更何况显色剂又是含水量极低,不会影响洋品的斑点扩散,那么问题就集中在点样这个操作程序上了.点样是将被层析分配的几种氨基酸混合液,和为了对照实验结果,而分别配制的几种氨基酸的溶液,用微量点样管或毛细管,或血球计数器将5一j5微升的样品,点在以滤纸为惰性支持物的层析纸上设计好的多点位置中去.点样后要自然风干,或冷风吹干.最好不要用加热装置,如吹风机,灯泡之类的热源将其样品点加速干燥.因为加热装置在学生操作时,一但注意不够,掌握不好,则温度升高势必要使样品破坏,更会使佯品点干的太燥.正是由于这样,样品点太干燥,使其样品物的分子,牢固地吸牢在层析纸的纤维上.所以在展层过程中,样品点的每个物质分子,不能在层析纸上同时起步,而是形成了有先有后,鱼贯而上行或下行的状况,最终使洋品物质的分子,不能同时都集中到达一个位置.致使在显色后,实验结果的图象上,观察到的不是一个完整的斑点,而是一个拖着尾巴的斑点.这就是上述所说的拖尾现象.
卤、结束语 ’
纸上分配层析所出现的拖尾现象,究其原因很简单,就是在点样品后,样品点吹的太干燥所致.原因太简单了,往往被人们容易忽略,更引不起人们的重视.但它确实在困扰着人们的实验效果.为此,建议应在该实验的点样操作中,加上一句,“样品点不要砍的太干燥,否则,样品物质的分子,会牢吸在层析纸的纤维上,出现拖尾现象”.
摘自：
1994年 3期《晋东南师专学报》：-67-67,95
关于对用“纸层析法分离鉴定氨基酸”实验中出现拖尾现象的分析
赵晋德