李玲,2009,《植物生理学模块实验指导》中蒽酮法测可溶性糖的蒽酮试剂是怎么配的?下面是实验步骤(李玲,2009,植物生理学模块实验指导(很好的一本实验指导书))(一)可溶性糖的提取称
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/21 19:43:00
李玲,2009,《植物生理学模块实验指导》中蒽酮法测可溶性糖的蒽酮试剂是怎么配的?下面是实验步骤(李玲,2009,植物生理学模块实验指导(很好的一本实验指导书))(一)可溶性糖的提取称
李玲,2009,《植物生理学模块实验指导》中蒽酮法测可溶性糖的蒽酮试剂是怎么配的?
下面是实验步骤(李玲,2009,植物生理学模块实验指导(很好的一本实验指导书))
(一)可溶性糖的提取
称取新鲜果肉0.5-1.0g(或植物叶片或种子于105~110℃烘箱杀青15 min,然后将温度调至70~80℃烘干至恒重,磨碎烘干的叶片或种子),剪碎研磨至匀浆,倒入三角瓶(50ml)中,加入10mL80%乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40 min,冷却后4000g离心10min,残渣加5mL 80%乙醇重复提取2次,合并上清液.在收集液中加10 mg活性炭,80℃脱色30 min,过滤,80%乙醇定容至25mL,取滤液供测定.
(二)显色及比色
吸取上述乙醇提取液0.2mL加入0.8ml蒸馏水混合,再加入5mL蒽酮试剂,沸水浴中显色10 min,取出冷却.在波长625 nm处测吸光值.从标准曲线上查取可溶性糖的含量.
(三)绘制标准曲线
取标准葡萄糖溶液将其稀释成0~100 μg•mL-1的不同浓度的溶液(0、10、20、40、60、80、100 μg•mL-1).分别取1 mL,按上述方法进行显色、比色,测定625 nm处的吸光值,
绘制标准曲线.
可溶性糖含量(mg/g)=C*V*n/a*W*1000
式中:C为查到的待测果实中葡萄糖含量(ug/ml);a为样品提取液体积(ml);V为提取液定容体积(ml);n为稀释倍数;W为果实重量(g)
李玲,2009,《植物生理学模块实验指导》中蒽酮法测可溶性糖的蒽酮试剂是怎么配的?下面是实验步骤(李玲,2009,植物生理学模块实验指导(很好的一本实验指导书))(一)可溶性糖的提取称
75%硫酸的配制
量取双蒸水75ml,倒入一烧杯中,量取225ml浓硫酸,沿烧杯壁缓慢加入烧杯中,边加边搅拌,冷却后使用.
蒽酮反应液
称取0.6g蒽酮,倒入棕色瓶中,加10ml无水乙醇助溶,将300ml75%硫酸倒入棕色瓶中,用吸管轻轻吹打,直至蒽酮完全溶解,临用前配制.
你根据自己想要的浓度换算一下就可以的