请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/24 01:58:59

请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的?请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的?请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝

请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的?
请问,
PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的?

请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的?
凝胶层的不连续性：不连续系统的凝胶包括浓缩胶和分离胶.浓缩胶的孔径大,分离胶的孔径小.在电场的作用下,蛋白质颗粒在大孔胶中泳动时遇到的阻力小,移动快.而在小孔胶中泳动时遇到的阻力大,移动慢.因此,在两层凝胶的交界处,由于凝胶孔径的不连续性使样品迁移受阻而压缩成很窄的区带.
缓冲液离子成分和pH的不连续性：在两层凝胶中均有Tris和HCl.Tris的作用是维持溶液的电中性及pH.HCl在一定pH条件下易解离出Cl-,它在电场中迁移率大,走在最前面,故称为快离子或前导离子.电极缓冲液中的甘氨酸在pH8.3的缓冲液中解离度很小,仅为0.1-1%,因而在电场中迁移率很小,称为慢离子或尾随离子.血清中,大多数蛋白质pI在5.0左右,在pH8.3或6.7时均带负电荷,在电场中均移向正极,其有效迁移率介于快慢离子之间,于是蛋白质就在快慢离子间形成的界面处,被浓缩成极窄的区带.当进入pH8.9的分离胶时,甘氨酸解离度增加,其有效迁移率超过蛋白质,因此氯离子和甘氨酸离子沿着离子界面继续前进.蛋白质分子由于分子量大,被留在后面,然后分离成多个区带.
此外,电泳体系中电位梯度的不连续性对样品的浓缩和迁移也具有一定作用.

是不是说做PAGE的时候有浓缩胶和分离胶？
过浓缩胶是把蛋白压平，浓缩胶浓度大，所以蛋白在这一层被压平。然后进分离胶更容易分层

不连续电泳体系采用了两种或两种以上的缓冲液、PH值和孔径，能使稀的样品在电泳过程中浓缩成层，从而提高分辨力。

请问,PAGE原理（聚丙烯酰胺凝胶电泳）中,不连续电泳体系中的浓缩效应是如何产生的? SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳?比较说明SDS-PAGE（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳）和琼脂糖凝胶电泳的物质分离原理和特点? 聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理以及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)应该注意哪些问题非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)应该注意哪些问题聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳原理上有何不同?如题说具体点简述聚丙烯酰胺凝胶电泳测定生物分子分子量的原理 15%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的步骤和原理过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理是什么? 为什么SDS-PAGE的电极缓冲液浓度较聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳的浓度高? Native-PAGE 法非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳为什么要正负极倒置聚丙烯酰胺凝胶电泳条带是什么意思? 聚丙烯酰胺凝胶电泳的问题?请问,聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨率是因为哪三种效应呢?是道填空题谢谢啦聚丙烯酰胺凝胶电泳中蔗糖的作用（急）聚丙烯酰胺凝胶电泳跑大板胶后为何染色（银染）不均匀,什么原因? 连续聚丙烯酰胺凝胶电泳,不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳定义 .简述聚丙烯酰胺凝胶电泳测定生物分子分子量的原理,如何调节凝胶的孔径?