如何分离酵母菌
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/18 09:59:47
如何分离酵母菌
如何分离酵母菌
如何分离酵母菌
酵母菌的培养与分离
【实验目的】学习培养和分离酵母菌的技术和方法
【实验原理】
大多数酵母菌为腐生,其生活最适pH为4.5一6,常见于含糖分较高的环境中,例如果园土、菜地土及果皮等植物表面.酵母菌生长迅速,易于分离培养,在液体培养基中,酵母菌比霉菌生长得快.
利用酵母菌喜欢酸性环境的特点,常用酸性液体培养基获得酵母菌的培养液（这样做的好处是酸性培养条件则可抑制细菌的生长）,然后在固体培养基上用划线法分离之.
【实验材料和用具】
1、甘蔗、成熟葡萄或苹果等果皮、0.1%美蓝染液、1ml的无菌吸管、无菌培养皿等.
2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：
原料：马铃薯（200克）、葡萄糖（20克）、琼脂（15-20克）、蒸馏水（1000ml）.
配制方法：
（1）先将马铃薯去皮,切片,称200克并加蒸馏水1000ml,煮沸半小时,用纱布过滤,补足蒸馏水量至1000ml
,制成20%的马铃薯汁.
（2）在20%的马铃薯汁中加入琼脂,煮沸溶化,补足水分并在115摄氏度条件下高压灭菌20分种.
（3）加入葡萄糖,制成培养酵母菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基.
3、乳酸马铃薯葡萄糖培养液：配方同上,但不加琼脂而加乳酸,按每1000ml培养液中含5ml乳酸的量加入,并分装试管.
【实验步骤】
l、接种：取一小块果皮,不需冲洗,直接接入乳酸马铃薯葡萄糖培养液管中,置28一30℃,培养24小时,可见培养液变混浊.
2、培养,用无菌吸管取上述培养后培养液0.lml,注入另一管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,置28一30℃再培养24小时或稍长(过长则霉菌长出).
3、观察：用无菌操作法取少许菌液置于载玻片中央的0.l%美蓝染色液中,混匀后加盖玻片制成水浸片,先用低倍镜后换高倍镜观察酵母菌的形态和出芽生殖情况.
活酵母菌可使美蓝还原,从而使菌体不着色,用此方法可判断酵母菌的死活.
4、分离：马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板.用划线法分离酵母菌培养液,从而得到单个菌落.挑取单个菌落反复再次划线分离纯化,最终可获得纯培养.
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马铃薯葡萄糖琼脂培养基