Real-time PCR的原理及优点是什么?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/07 18:50:27

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Real-time PCR的原理及优点是什么?
Real-time PCR的原理及优点是什么?

Real-time PCR的原理及优点是什么?
博凌科为-为你real time PCR,即实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法,它是在PCR反应体系中加入荧光物质,并通过real time PCR检测系统对PCR反应进程中的荧光信号强度进行实时监测,最终对实验数据进行分析处理的方法.描述 PCR动态进程的曲线即扩增曲线.它实际上并不是一条标准的指数曲线,而是S形曲线,这是因为随着 PCR循环数的增加DNA聚合酶的失活,dNTP和引物的枯竭,反映副产物焦磷酸对合成反应的阻害等原因,致使PCR并非一直呈指数扩增,而最终将进入平台期.由于影响PCR扩增的因素错综复杂,因此每次PCR扩增时进入平台期的时机及信号高低变化很大,很难精确控制.尽管平台期的变化很大,但在扩增曲线的指数增长区的某一区域,重复性非常好,这对PCR的定量分析非常重要,如果在扩增曲线的指数增长区适当位置设定荧光检出界限值即阈值（threshold）就会得到阈值与扩增曲线的交点Ct值,Ct值是指达到阈值时的循环圈数（threshold cycle）,Ct值与起始模板数的对数值成反比线性关系.

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