柱层析的注意事项有哪些
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/24 09:15:40
柱层析的注意事项有哪些
柱层析的注意事项有哪些
柱层析的注意事项有哪些
1 装柱.柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的.干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行.装完的柱子应该要适度的紧 密（太密了淋洗剂走的太慢）,一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）.书中写 的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气泡就 全下来了.当然假如你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了.但是柱子更忌讳的是 开裂,甭管竖的还是横的,都会影响分离效果,甚至作废!2 加样.用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再 加少量的低极性溶剂,然后俅蚩钊绱肆饺危话闶⑸熬突臼前咨牧恕?加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（2～4cm就够了） ,再加压,这样避免了溶剂（如二氯甲烷等）夹带样品快速下行.3 淋洗剂的选择.感觉上要使所需点在rf0.0.3左右的比较好.不要认为在板上爬高了分的比较开,过 柱子就用那种极性,假如rf在0.6,即使相差0.2也不轻易在柱子上分开,因为柱子是一 个多次爬板的状态,可以通过公式的比较：0.6/0.8一次的分离度,肯定不如（0.2/0.3 ）的三次方或四次方大.4 样品的收集.用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡.所以假如样品与硅胶的吸附比 较强的话,就不轻易流出.这样就会发生,后面的点先出,而前面的点后出.这时可以 采用氧化铝作固定相.另外,收集的试管大小要以样品量而定,非凡是小量样品,假如用大试管,可能一根就 收到了三个样品,wuwu.假如都用小试管那工作量又太大.5 最后的处理.柱分后的产品,由于使用了大量的溶剂,其中的杂质也会累积到产品中,所以假如想送 分析,最好用少量的溶剂洗涤一下,因为大部分的杂质是溶在溶剂里的,一洗基本就没 了,必要时进行重结晶.另外,再过柱的时候,有时会出现气泡,一是 和使用的溶剂有关,假如是易挥发的溶剂,如乙醚、二氯甲烷等,在 室温稍高的情况下,很轻易出现这种现象,因此,在室温高的时候,可以选择沸点较高,挥发相对小的溶剂.还有,使用混合溶剂时,使用 的两种溶剂的沸点应该相差不大,如：乙酸乙酯和石油醚(60~90),而 乙醚却要选择30－60的石油醚.二是：不论是用带砂板的还是塞棉花的,在装柱之前,都要将空气用加压的方法将空气排干,这样就可避免柱中有 空气!过柱子需要耐心,不要着急.