关于sds-pega电泳 样品处理小弟在做sds-pega电泳,不晓得蛋白怎么处理.该用什么溶解,配方是什么?加了溴酚蓝后蓝色是否明显?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/24 07:26:33
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关于sds-pega电泳 样品处理
小弟在做sds-pega电泳,不晓得蛋白怎么处理.该用什么溶解,配方是什么?加了溴酚蓝后蓝色是否明显?

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SDS-PAGE,不是sds-pega……
对于SDS-PAGE中的样品蛋白没有太大的要求,只需要其能够充分溶解或者悬浮在液体中即可.也就是说,你的蛋白应该是可溶的,或者是被你用振荡、超声、或者移液枪的吹吸打散了的.不需要用特定的溶液溶解,但是上样前需要加入1/5倍样品体积的5X载样液（Loading Buffer,62.5mMol/L Tris-HCl 8.0,2% SDS,25%甘油,0.01%溴酚蓝）并沸水加热3min左右,经12,000rpm×1min离心,取上清上样.

将样品置于1×SDS凝胶加样缓冲液中，在100 ℃加热3 min以使蛋白质变性
50 mmol/L Tris•Cl（pH 6.8）
100 mmol/L 二硫苏糖醇（DTT）
2% SDS（电泳级）
0.1% ...

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将样品置于1×SDS凝胶加样缓冲液中，在100 ℃加热3 min以使蛋白质变性
50 mmol/L Tris•Cl（pH 6.8）
100 mmol/L 二硫苏糖醇（DTT）
2% SDS（电泳级）
0.1% 溴酚蓝
10% 甘油
若蛋白具有由二硫键形成的高级结构，需加入巯基乙醇使二硫键还原成巯基
该缓冲液本身就是蓝色，很明显的

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