β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚学这个,不懂,望高人指导,不胜感激.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/18 12:32:08
β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚学这个,不懂,望高人指导,不胜感激.
β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚学这个,不懂,望高人指导,不胜感激.
β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚学这个,不懂,望高人指导,不胜感激.
描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin
做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化（比如对某个细胞因子的反应）,这时β-Actin起到几个作用：
1、如果目的蛋白检测不到而且β-Actin也检测不到,那么你的体系有问题,因为β-Actin是看家基因编码的,理论上是100％检测到的；
2、如果目的蛋白检测不到但β-Actin检测到,说明目的蛋白没有表达或者量很低；
3、作为看家基因,β-Actin被认为表达水平不受其它因素影响,是比较稳定的.当细胞接受细胞因子刺激后,目的蛋白的量在参考β-Actin的量后可能发生变化,这时β-Actin还起到一个半定量的作用.
所谓内参就是内部参照的意思.
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Western的抗体通常分为一抗和二抗,一抗结合目的蛋白,这是Western变化最多的地方；二抗则比较通用,商品很成熟,二抗带有荧光或者酶标记,它是结合一抗的,但却是得到结果的重要试剂.这种方法属于间接标记.Western很少有直接标记的方法.
β-Actin是管家基因，在不同细胞中均有表达。用其作为内参，是指在western实验中通过内参的含量的多少来调整样品之间的上样量，相当于作为标准曲线的作用，只有调整样品的上样量使得内参的含量一致才能比较不同蛋白间表达量的差别。western使用的抗体视个人所需不同，可以是兔抗、羊抗、鼠抗，做之前要先查阅相关资料...
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β-Actin是管家基因，在不同细胞中均有表达。用其作为内参，是指在western实验中通过内参的含量的多少来调整样品之间的上样量，相当于作为标准曲线的作用，只有调整样品的上样量使得内参的含量一致才能比较不同蛋白间表达量的差别。western使用的抗体视个人所需不同，可以是兔抗、羊抗、鼠抗，做之前要先查阅相关资料
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