液相色谱仪的使用步骤?

液相色谱仪的使用步骤?
液相色谱仪的使用步骤?

液相色谱仪的使用步骤?
目的：制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程.
范围：适用于Agilent 1260 HPLC.
责任：色谱检验工程师负责本规程执行.
内容：
1 开机
1.1 打开电脑.
1.2 打开液相色谱各个模块的电源.
1.3 双击桌面“仪器—联机”,进入联机界面.
1.4 排气：
1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）.
1.4.2 右键单击“泵”图标区域,选择“方法…”选项,进入泵编辑画面,设流速：5ml/min（一般为3－5ml/min）,点击“确定”.
1.4.3 右键单击“泵” 图标,点击“控制…”选项,选中“ON”,点击“确定”,则系统开始冲洗,直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,（一般为5分钟）,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止.
1.4.4 右键单击“泵” 图标,点击“方法…”选项,设流速：0ml/min,手动旋紧冲洗阀.
1.4.5 右键单击“泵”图标,点击“方法…”选项,按照方法要求选择合适比例的流动相,设流速：1.0ml/min.
1.4.6 同理右键单击“柱温箱”,“检测器”图标,点击“方法…”选项,按照方法的要求设置温度,波长,点击“控制” 选项,“ON”打开柱温箱和检测器.
2 编辑方法
2.1 点击“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法.
2.2 选中除“数据分析 ”外的三项,进入下一选项卡.
2.3 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）.进入下一选项卡.
2.4 泵参数设定：在“流速”处输入流量, 如1.0ml/min,停止时间：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间）,按照要求选择合适比例的流动相配比,如乙腈：水＝75：25,A为水,B为乙腈,则设置B：75％即可.进入下一选项卡.
2.5 自动进样器参数设定: 选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置,进入下一选项卡.
2.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度.进入下一选项卡.
2.7 UV检测器参数设定: 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm.点击确定.
2.8 在“ 运行时选项表 ”中,选中“ 数据采集”,点击“确定”.
2.9 从“方法”菜单,选中“方法另存为…”,输入一方法名,如“测试”,点击“确定.
3 单次采集
3.1 从“运行控制”菜单中,选择“样品信息”选项,选择合适的路径,在“数据文件”中选择 “前缀/计数器”,输入样品瓶的位置,点击“确定”.
3.2\x09基线平稳后约10分钟,从“运行控制”菜单中选择“运行方法”.
4 多次数据采集
4.1 按照步骤2 编辑完整方法.
4.2 点击“序列”－“序列表”,输入“样品瓶”“样品名称”,“进样次数”,选择合适的“做样方法”
4.3 点击“序列”－“序列参数”,选择序列数据的保存路径（序列会自动生成以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据）,数据建议以选择 “前缀/计数器”保存.
4.4 从“序列”菜单,选中“序列另存为…”,输入一序列名,如“测试”,点击“确定.
4.5 从“运行控制”菜单中选择“运行序列”.
5 数据分析（脱机状态使用）
5.1 双击“仪器 —脱机”图标 进入的脱机画面.
5.2 从“视图”菜单中,点击“数据分析”进入数据分析画面.
5.3 从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件名.点击“ 确定”,则数据被调出.（如预建立标准曲线,应先打开浓度较低的标样图谱.）
5.4 做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”.从“范围” 中选择“满量程” 或“自动量程” 及合适的时间范围或选择“自定义量程” 调整.反复进行,直到图的比例合适为止.点击“ 确定”.
6 积分:
6.1 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项,选择合适的“斜率灵敏度”,“峰宽”,“最小峰面积”,“最小峰高”.点击 ,自动加载积分参数.
6.2 点击左边“√”图标,将积分参数存入方法并退出“积分事件”.
6.3 如积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止.
7 标准曲线
7.1 点击“校正”－“校正设置”,输入“含量单位”.
7.2 点击“校正”－“新建校正表”,点击确定.输入“化合物名称”和“含量”,点击“确定”,按照提示删除其他组分.
7.3 至此完成单级校正,如要增加校正级别,应从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件名（第二个标样）,点击“校正”－“添加级别”,点击确定,输入“含量”,依次增加校正级别.
8 打印报告
8.1 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项,点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角,选中“外标法”,其它选项不变,点击“ 确定”.
8.2 从“报告”菜单中选择“打印报告”,则报告结果将打印到屏幕上,如想输出到打印机上,则点击“报告” 底部的“打印”钮.
8.3 点击“文件”－“另存为”－“方法”,把数据分析方法保存,下次分析可直接在“文件”－“调用”－“方法”下,将该方法调出使用.（调用的方法中含有积分方法,标准曲线方法和打印报告方法）
9 关机
9.1 关机前,先关紫外灯,用相应的溶剂（甲醇或乙腈）充分冲洗系统大约30分钟.（色谱柱最终应保存在甲醇或乙腈中）
9.2 退出化学工作站,依提示关泵,及其它窗口,关闭计算机.
9.3\x09关闭Agilent 1260各模块电源开关.
10 其它注意事项
10.1\x09当样品运行时,切勿打开自动进样器前遮盖,否则进样过程停止.
10.2\x09系统发生漏液时,机器会检测到并停止进样,状态指示灯为红色.检查擦干并安置好漏液处,擦干漏液传感器,单击ON按钮,系统重新初始化.
10.3\x09注意紫外灯使用寿命,切勿来回开关紫外灯.