用普通RT试剂盒(富酶泰斯的)逆转录出的cDNA,可作为实时荧光定量PCR反映中的DNA模板用嘛?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/18 03:40:16
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用普通RT试剂盒(富酶泰斯的)逆转录出的cDNA,可作为实时荧光定量PCR反映中的DNA模板用嘛?
可以,RNA提取的质量要好,纯度要高

如果你本来提取的是mRNA或者Total RNA,那不论哪家出的RT试剂盒所得到的cDNA都可以作为实时荧光定量PCR反映中的DNA模板用。
前提是RNA的质量要有保证。纯度是一个因素,260/280的比值至少要大于1.8。还有就是最好先把RNA跑一个胶看看,如果是提取的Total RNA,应该能看到2条明亮的条带(rRNA),中间没有拖带。说明没有降解。...

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如果你本来提取的是mRNA或者Total RNA,那不论哪家出的RT试剂盒所得到的cDNA都可以作为实时荧光定量PCR反映中的DNA模板用。
前提是RNA的质量要有保证。纯度是一个因素,260/280的比值至少要大于1.8。还有就是最好先把RNA跑一个胶看看,如果是提取的Total RNA,应该能看到2条明亮的条带(rRNA),中间没有拖带。说明没有降解。

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