为什么在HE染色标本上脂滴被溶去?苏木精和伊红到底是什么?如题,谢谢~~
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 08:26:01
为什么在HE染色标本上脂滴被溶去?苏木精和伊红到底是什么?如题,谢谢~~
为什么在HE染色标本上脂滴被溶去?苏木精和伊红到底是什么?
如题,谢谢~~
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HE标本一般是针对石蜡标本,脂滴和石蜡都是的有机物,
都具有非极性,脂滴应该可以溶解石蜡的.
HE染色就是用苏木精和伊红对细胞内的核糖体和细胞质染色的方法.
H：Hematoxylin,苏木精
E：Eosin,伊红
苏木精(Hematoxylin,H)是一种碱性染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱性染料染色的结构具有嗜碱性.
伊红(,E)是一种酸性染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸性染料染色的结构具有嗜酸性.染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,最后入蒸馏水,就可染色.
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HE染色石蜡切片制作基本过程
1、取材与固定：
从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林,Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构.
2、脱水透明：
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去组织块中的水份.再将组织块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块的中酒精,才能浸蜡包埋.
3、浸蜡包埋：
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温.待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒),倒入已溶化的石蜡,迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中.冷却凝固成块即成.包埋好的组织块变硬,才能在切片机上切成很薄的切片.
4、切片与贴片：
将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片,一般为5—8微米厚.切下的薄片往往皱折,要放到加热的水中烫平,再贴到载玻片上,放45℃恒温箱中烘干.
5、脱蜡染色：
常用HE染色,以增加组织细胞结构各部分的色彩差异,利于观察.苏木精(Hematoxylin,H)是一种碱性染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱性染料染色的结构具有嗜碱性.伊红(Eosin,E)是一种酸性染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸性染料染色的结构具有嗜酸性.染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,最后入蒸馏水,就可染色.
HE染色过程是：
①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟.
②酸水及氨水中分色,各数秒钟.
③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻.
④入70％和90％酒精中脱水各10分钟.
⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟.
6、脱水透明：
染色后的切片经纯酒精脱水,再经二甲苯使切片透明.
7、封固：
将已透明的切片滴上加拿大树胶,盖上盖玻片封固.待树胶略干后,贴上标笺,切片标本就可使用.